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背景喉癌是发生在头颈部的一种恶性肿瘤,在呼吸系统肿瘤中发病率居第二位,约占全身恶性肿瘤的1%～5%,以原发性喉鳞状细胞癌（LSCCs）为主,临床表现为声音嘶哑、呼吸困难、咳嗽、吞咽困难和喉痛等症状,严重影响患者的生活质量。临床常通过喉镜和影像学技术检查喉腔情况、癌前病变和早期喉癌病变,并进行全喉切除治疗或同步放化疗方法治疗。喉癌发生、发展的病理生理机制尚不十分清楚,其诱发病因可能与病毒感染、饮酒、吸烟和性激素等因素有关。喉癌发病率男性明显高于女性。目前,炎症反应和/或全身免疫状态在恶性肿瘤发生发展和转移中的作用是研究的热点。为寻找评估喉癌诱发和预后的理想生物标志物,我们对喉癌患者术前血液细胞学和止凝血功能进行了检查,并对血小板相关参数进行了分析,以及通过CCK8试验、流式细胞术、实时荧光定量PCR技术（q RT-PCR）和Transwell侵袭试验研究了血小板对喉癌细胞增殖、凋亡、侵袭和分泌炎性细胞因子等产生的影响,以期深入探讨血小板影响喉癌进展和转移的分子机制,为临床早期诊断和治疗喉癌提供理论依据。目的观察喉癌患者血液血小板及其相关指标的改变,找寻早期预测或诊断喉癌的血小板相关生物标志物;研究血小板对喉癌细胞Hep-2增殖、凋亡、侵袭和表达炎性细胞因子的影响,旨在进一步探讨血小板促进喉癌进展和转移的分子机制。方法1.临床研究对象选择新乡医学院第一附属医院入住的喉癌患者38例,为实验组,其中男性37例,女性1例,年龄52～79岁,术前均行喉部CT、MRI、电子喉镜检查及病理活检予以确诊。同期随机选择门诊体检的健康人员49例,其中男性42例,女性7例,年龄44～88岁。所有入围对象均知情同意,并且其年龄、性别比较无显著性差异。2.实验室检测指标的评价（1）血小板相关指标检测:所有患者手术治疗前和正常人群均通过全自动血细胞分析仪器检测血常规指标:血小板计数（PC）、血小板分布宽度（PDW）、平均血小板体积（MPV）、大型血小板比率（P-LCR）和血小板比容（PCT）。基于血常规结果,计算血小板与淋巴细胞比率（PLR）、血小板与MPV比率（PC/MPV）、血小板与PDW比率（PC/PDW）等指标。（2）凝血和纤溶功能评价:部分喉癌患者手术治疗前检测凝血和纤溶指标:（1）凝血指标:凝血酶原时间（PT）、PT国际标准化比值（PT-INR）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fbg）和凝血酶时间（TT）。（2）纤溶指标:D-二聚体（D-D）和纤维蛋白原降解产物（FDPs）。（3）实验室检测结果的比较:使用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析,喉癌患者治疗前与正常对照组比较采用均值t检验,并通过ROC曲线评价血小板相关指标的临床诊断效能。P＜0.05为有统计学差异。2.血小板对Hep-2细胞生物学功能的影响（1）血小板对Hep-2细胞增殖能力的影响:分别使用来自同一个体且浓度不同的富血小板血浆（PRP）培养Hep-2细胞,通过CCK8试验检测血小板对Hep-2细胞增殖能力的影响。（2）血小板对Hep-2细胞凋亡能力的影响:分别使用来自同一个体且浓度不同的PRP培养Hep-2细胞,通过流式细胞术检测血小板对Hep-2细胞凋亡能力的影响。（3）血小板对Hep-2细胞侵袭能力的影响:分别使用来自同一个体的PRP和乏血小板血浆（PPP）培养Hep-2细胞,通过Transwell侵袭试验检测血小板对Hep-2细胞侵袭能力的影响。（4）血小板对Hep-2细胞表达细胞因子的影响:分别使用来自同一个体的PRP和PPP培养Hep-2细胞,通过q RT-PCR技术检测检测血小板对Hep-2细胞表达细胞因子（IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α）的影响。结果1.喉癌患者血小板相关指标的临床意义与正常对照组比较,喉癌患者治疗前的血小板淋巴细胞比率（PLR）出现异常升高（P＜0.01）,并且PLR具有较好的灵敏度、特异度（AUC=0.817）,能较好地辅助临床早期预测或诊断喉癌。2.喉癌患者治疗前的凝血和纤溶功能评价喉癌患者治疗前的凝血和纤溶功能指标基本上都在正常参考范围内,无异常改变。3.血小板影响Hep-2细胞的生物学功能使用不同浓度的血小板培养基培养喉癌Hep-2细胞,发现血小板可以提升Hep-2细胞的增殖、侵袭能力,抑制其凋亡。4.血小板影响Hep-2细胞表达细胞因子血小板可增强Hep-2细胞表达炎性细胞IL-1、IL-6、TNF-αm RNA,抑制抗炎细胞因子IL-10 m RNA的表达。结论1.血小板相关的PLR可作为一种炎性指标,用于早期预测或辅助诊断喉癌。2.血小板可以影响Hep-2细胞的生物学功能,促进其表达炎性细胞因子。