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目的:目前已报道了线粒体自噬等与细胞器相关的多种选择性自噬,推测可能存在降解和清除细胞器高尔基体的高尔基体自噬。本课题拟证明一种新型选择性自噬-高尔基体自噬的存在,发现高尔基体外膜蛋白GOLPH3能够作为自噬受体蛋白调控高尔基体自噬的发生,且高尔基体自噬介导了apelin-13/APJ促心肌细胞肥大的过程。方法:1.采用荧光显微镜观察高尔基体顺式膜囊标志蛋白GM130-RFP与自噬标志蛋白LC3B-GFP的荧光共定位情况;2.采用荧光显微镜观察高尔基体反式膜囊标志蛋白TGN46-RFP与自噬标志蛋白LC3B-GFP的荧光共定位情况;3.采用透射电镜观察高尔基体自噬的发生;4.采用免疫共沉淀技术观察GOLPH3与LC3B的蛋白相互作用。5.采用siRNA干扰GOLPH3来观察高尔基体自噬的情况;6.过表达APJ受体观察高尔基体自噬的发生;7.免疫组化观察尸检心肌肥厚病人体内GOLPH3的表达情况;8.细胞计数仪检测心肌细胞直径及体积。结果:1.饥饿诱导大鼠心肌细胞(H9c2)、人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMCs)以及人胚胎肾细胞(HEK293T)内的高尔基体标志蛋白和自噬标志蛋白发生荧光共定位;2.缺氧诱导大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞、人主动脉平滑肌细胞以及人胚胎肾细胞内高尔基体标志蛋白和自噬标志蛋白发生荧光共定位;3.雷帕霉素诱导大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞、人主动脉平滑肌细胞以及人胚胎肾细胞内高尔基体标志蛋白和自噬标志蛋白发生荧光共定位;4.高尔基体应激诱导剂(BelfeldinA、Nocodazole、Monensin、Nigericin)引起大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞、人主动脉平滑肌细胞以及人胚胎肾细胞内高尔基体标志蛋白和自噬标志蛋白发生荧光共定位;5.心肌细胞肥大的诱导剂(Apelin-13、过表达APJ、Ang II、压应力)引起大鼠心肌细胞内高尔基体标志蛋白和自噬标志蛋白发生荧光共定位;6.透射电镜结果显示饥饿诱导大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞及人主动脉平滑肌细胞发生高尔基体自噬;7.透射电镜结果提示心肌细胞肥大的诱导剂(Apelin-13、Ang II、压应力)引起大鼠心肌细胞发生高尔基体自噬;8.饥饿、缺氧、雷帕霉素诱导大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞及人主动脉平滑肌细胞内GOLPH3与LC3B发生蛋白相互作用;9.高尔基体应激诱导剂(BelfeldinA、Nocodazole、Monensin、Nigericin)引起大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞及人主动脉平滑肌细胞内GOLPH3与LC3B发生蛋白相互作用;10.心肌细胞肥大诱导剂(Apelin-13、过表达APJ、Ang II、压应力)引起大鼠心肌细胞内GOLPH3与LC3B发生蛋白相互作用;11.干扰GOLPH3的表达能够抑制大鼠心肌细胞、人脐静脉内皮细胞、人主动脉平滑肌细胞以及人胚胎肾细胞内高尔基体标志蛋白和自噬标志蛋白的荧光共定位情况;12.透射电镜结果显示干扰GOLPH3的表达能够抑制大鼠心肌细胞内的高尔基体自噬;13.Apelin-13/APJ能够上调H9c2心肌细胞内GOLPH3的表达;14.Apelin-13/APJ通过高尔基体自噬途径诱导心肌细胞肥大;15.尸检心肌肥厚病人的心肌组织内GOLPH3的表达增加。结论:本课题揭示了新型选择性自噬-高尔基体自噬的存在,且GOLPH3能够作为自噬受体蛋白调控高尔基体自噬的发生,高尔基体自噬介导了Apelin-13/APJ促心肌细胞肥大的过程。