铁皮石斛芽枯病病原菌鉴定、药剂筛选及病害防治

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铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是我国传统道地中草药,国家二级珍稀濒危保护植物。近年来对于铁皮石斛产品的需求日益增加,野生铁皮石斛资源被过度采挖已近枯竭,人工栽培的铁皮石斛面积、产量不断增加,但随之而来的是日趋严重的铁皮石斛病害。本课题组在浙江省乐清市的种植基地发现一种危害芽部和顶端叶片并造成枯萎症状的病害,本文对引起该病害的病原菌进行了分离鉴定,并筛选了对此病害具有防治效果的农药制剂。具体结果如下:1.田间调查发现,病害初期表现为芽部变黄、枯萎,随病情发展,病斑逐渐扩展至顶端各叶片,生长点死亡,植株停止生长。根据从芽部发病的特征,我们将此病害命名为“铁皮石斛芽枯病”,对该病害的研究未见报道。2.从61株铁皮石斛芽枯病植株中共分离得到127株真菌分离株,根据形态特征对所分离到的分离株进行分组,并通过multi-locus sequence analysis(MLSA)技术构建基于ITS、LSU、tub2、rpb2拼接序列的系统发育树,确定所得真菌为:Ectophoma mul-tirostrata、Alternaria arborescens和Stagonosporopsis pogostemonis。经过致病性测试,发现三个菌种均能引起铁皮石斛芽枯病。其中,S.pogostemonis为首次发现能引起铁皮石斛病害。在所分离到的菌株中,E.multirostrata占比最高,为71.6%。3.针对占比最高的菌株E.multirostrata,本研究通过平板抑菌试验进行农药筛选。实验选用了市场上应用的7种具有不同作用机理的农药:50%异菌脲可湿性粉剂、33.5%喹啉铜悬浮剂、50%多菌灵可湿性粉剂,722 g/L霜霉威盐酸盐水剂、250 g/L嘧菌酯悬浮剂、200 g/L氟酰羟·苯甲唑悬浮剂、400 g/L氯氟醚·吡唑酯悬浮剂。实验结果发现,异菌脲、喹啉铜、氟酰羟·苯甲唑对E.multirostrata有较好抑制效果,EC50分别为:2.10 mg/L,1.78 mg/L,0.09 mg/L;其中,氟酰羟·苯甲唑的抑制效果最佳。4.选用氟酰羟·苯甲唑进行培养箱盆栽和田间防治试验。培养箱盆栽试验中,选取12株健康植株接种病原菌,接种后置于25℃培养箱(12 h光照/黑暗交替)中培养3天,然后实验组6株植株喷施80 mg/L氟酰羟·苯甲唑,对照组6株植株喷施无菌水。继续在25℃培养箱(12 h光照/黑暗交替)中培养21天后进行观察统计,发现实验组植株全部保持健康,对照组植株全部发病,80 mg/L氟酰羟·苯甲唑对芽枯病的抑制率达100%。田间试验中,选择芽枯病发病田块喷施80 mg/L氟酰羟·苯甲唑,喷药21天后对病情指数进行统计,发现在大田环境下80 mg/L氟酰羟·苯甲唑的防效为27.7%。本研究报道了一种新病害—铁皮石斛芽枯病,并对引起芽枯病的病原菌进行了鉴定,通过体外、体内药剂试验,我们筛选到了对芽枯病有较好防治效果的药剂。
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