简介:绒毛外滋养细胞(EVT)侵袭到母体子宫基质和血管对于成功的妊娠至关重要。缺氧/复氧(H/R)这一环境因素近年来被报道是子痫前期(PE)的重要诱因,该疾病的特征是EVT侵袭不足,但其致病机制仍被知甚少。方法:采用流式细胞术(FCM)检测细胞活力、凋亡和细胞周期。免疫印迹法(western blot,WB)被用于检测PCNA、DNMTs、MMP-2和-9、TIMP3及integrin-b1和-a5的蛋白水平。用免疫荧光法(IFC)检测EVT的纯度。Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。绒毛外植体实验被用于验证EVT的迁移能力。结果:H/R不影响滋养细胞的活力、凋亡和细胞周期。DNMT1、DNMT3a在原代EVT和HTR-8/SVneo细胞中的表达在H/R处理后明显下调,而DNMT3b的蛋白水平却只在HTR-8/SVneo细胞中下调。H/R处理使EMT促进因子在原代EVT中表达下降、上皮标志因子E-cadherin表达升高,而在HTR-8/SVneo细胞中不被影响。原代EVT和HTR-8/SVneo细胞的迁移和侵袭能力以及绒毛外植体的延展能力在H/R处理后明显下降。侵袭能力相关因子MMP-2和-9及integrin-b1和-a5的蛋白水平在两种细胞中都明显下调。结论:H/R处理导致EVT的迁移和侵袭能力受损,这与MMP-2和-9及integrin-b1和-a5的下调相关,该过程可能涉及以DNMTs下降为特征的甲基化水平降低和EMT过程的逆转。