目的 成功沉默结肠癌SW480细胞中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)后,对 TGF-β1 诱导的结肠癌上皮-间质转化(Epithlial mesenchymal transition,EMT)以及对结肠癌增殖、迁移的影响。方法 培养结肠癌SW480细胞至对数生长期后,对细胞进行如下处理:1分别用Ong/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL浓度的转化生长因子β1(TGF-β1)刺激结肠癌SW480细胞24h及48h诱导其EMT过程后,采用CCK-8实验观察细胞的增殖情况;并用Western blot检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达量的变化。2用lip2000将siRNA转染至SW480细胞中,根据转染物质的不同,实验分为了三组,即空白对照组,无意义序列组(转染siRNA-NControl)和转染组(转染siRNA-NRP-1)。转染后常规培养48h,分别通过实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和 Western blot检测每组细胞中 NRP-1的mRNA和蛋白的表达量。3利用上述诱导及转染成功方法,将细胞分成4组:无意义序列组(转染siRNA-NControl)、转染组(转染siRNA-NRP-1)、诱导组(TGF-β1)、转染+诱导组(TGF-β1+转染siRNA-NRP-1)。待转染及诱导成功后,用Westen blot检测细胞中E-cadherin及Vimetin的表达量;CCK-8和划痕实验检测每组细胞的增殖、迁移情况。结果 1 SW480细胞在10ng/mL的TGF-β1刺激48h时发生了明显的EMT,细胞增殖最明显同时伴随E-cadherin蛋白表达量显著低于其他3组,Vimentin蛋白表达量显著高于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05)。2通过用lip2000转染siRNA 48h后,应用RT-qPCR和Western blot分别检测每组细胞NRP-1的mRNA和蛋白的表达,结果提示转染组与空白组和无意义序列组相比,转染组的NRP-1表达量显著被降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3 Western Blot检测无意义序列组、转染组、诱导组、转染+诱导组,结果提示E-cadherin蛋白表达量转染+诱导组高于诱导组,Vimentin的蛋白表达量转染+诱导组低于诱导组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。4 CCK-8实验结果显示,转染组的OD值低于无意义序列组,转染+诱导组低于诱导组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。5划痕实验检测每组细胞的迁移情况,转染组迁移能力慢于无意义序列组,同样转染+诱导组慢于诱导组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 结肠癌SW480细胞经TGF-β1诱导后能成功发生EMT,但成功沉默NRP-1后,能够部分逆转结肠癌细胞发生的EMT过程,以及使结肠癌细胞增殖能力减小,迁移能力减弱。图7幅;表8个;参180篇。