【摘 要】
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目的:分析咽喉反流性疾病(laryngopharyngeal reflux disease,LPRD)动物模型的咽喉部黏膜下炎症浸润程度和P物质(SP)、神经肽受体-1(NK-1R)、蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、白细
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目的:分析咽喉反流性疾病(laryngopharyngeal reflux disease,LPRD)动物模型的咽喉部黏膜下炎症浸润程度和P物质(SP)、神经肽受体-1(NK-1R)、蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、白细胞介素8(IL-8)等基因表达情况,探讨咽喉反流性疾病与神经源性炎症(neurogenic inflammation)相关性。方法:将40只健康白化雄性豚鼠随机分为实验组与对照组,每组20只。咽喉反流动物模型采用内源性方式构建,1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉豚鼠后将其固定于平板上,硬膜外麻醉管经口插管至食管中上段(距口角约5-6cm),以8滴/分速度分别灌注模拟胃液及生理盐水。40只豚鼠均灌注14天后处死,取环后区黏膜组织备用。行常规石蜡切片HE染色检测咽喉部黏膜白细胞浸润程度;行实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCRqPCR)分别检测SP、NK-1R、PGP9.5、IL-8等基因表达;行蛋白印迹技术分别检测NK-1R、PGP9.5等蛋白表达,并对组间白细胞计数以及基因、蛋白的表达进行统计分析。结果:1、实验组黏膜下层白细胞浸润较对照组增多,差异具有统计学意义(P(27)0.05);2、实验组与对照组SP mRNA表达差异无统计学意义(P(29)0.05);实验组NK-1R、IL-8、PGP9.5mRNA表达较对照组均上调(6.32、3.34、2.27),组间差异具有统计学意义(P(27)0.05);3、实验组NK-1R、PGP9.5蛋白表达较对照组均上调,组间差异具有统计学意义(P(27)0.05)。结论:实验组咽喉部黏膜NK-1R表达上调提示神经源性炎症可能参与了咽喉反流性疾病的发展;实验组IL-8表达上调提示NK-1R的表达增强可能以全长型受体为主。实验组咽喉部PGP9.5表达上调提示了咽喉部感觉神经纤维的密度增加,咽喉反流性疾病患者咽喉部高敏性可能与感觉神经纤维密度增加有关。
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