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桑黄属担子纲、多孔菌目、多孔菌科,层孔菌属,是一种珍贵的药用真菌。其子实体入药,味微苦,能利五脏、软坚、排毒、止血、活血等。现代研究表明,该真菌中含有三萜、多糖和黄酮等活性成分,具有抗肿瘤、增强免疫以及抗肝纤维化作用。是一种具有开发价值的珍贵药用真菌,也是开发保健品的重要原料。
本文以桑黄子实体为原料,研究桑黄多糖的提取工艺、水提粗多糖的降糖活性和调节血脂的功能以及桑黄多糖分散片的制备和质量控制,为桑黄的开发利用提供依据,主要研究内容和结果如下:
1.桑黄粗多糖的提取工艺和含量测定研究。根据单因素和正交试验,对桑黄多糖得率影响的主次顺序为:温度>时间>料液比。最佳提取工艺条件为料液比1:20、温度100℃、时间3h、提取3次,该工艺条件下多糖的得率为5.52%,多糖含量为48.96%。
2.桑黄多糖的降糖活性研究。采用地塞米松诱导3T3-L1前脂肪细胞分化获得脂肪细胞,用此模型研究桑黄多糖体外降糖活性。桑黄多糖对上述细胞模型DMEM高糖培养基中的葡萄糖消耗有促进作用,桑黄多糖高、中、低剂量组培养基中葡萄糖的消耗量分别为6.76mmol/L、7.95mmol/L、6.79 mmol/L,阳性药马来酸罗格列酮组葡萄糖的消耗量为8.37 mmol/L。结果表明,桑黄多糖能够促进3T3-L1脂肪细胞对培养基中葡萄糖的消耗,其中7.95mmol/L剂量组与阳性药的作用相近。
采用链脲佐菌素致糖尿病小鼠模型,桑黄多糖分低、中、高三个剂量组给药。结果表明,桑黄多糖三剂量组小鼠的血糖,与给药前相比均有不同程度的下降,抑制率分别为11.99%、8.82%和6.35%,具有一定的抑制效果和量效关系;同时进行小鼠体重指标的考察,经21天喂养,正常组体重增加,模型组体重下降,桑黄多糖各剂量组与阳性对照组体重较模型组都有不同程度增加,结果表明桑黄多糖能够改善糖尿病导致的体重减轻的症状。本试验结果为降糖药物或功能食品的研究开发提供了依据。
3.桑黄多糖对糖尿病小鼠的血脂调节研究。降血脂结果表明,桑黄多糖对糖尿病小鼠甘油三酯、总胆固醇均具有一定的调节作用,能使糖尿病小鼠高密度脂蛋白恢复至正常水平。桑黄多糖低、中、高三剂量组糖尿病小鼠甘油三酯水平均有不同程度的下降,其值分别为:1.41mmol/L,1.33mmol/L,1.25mmol/L。桑黄多糖组在给药21d后,小鼠的总胆固醇水平都有不同程度的下降,其总胆固醇含量分别为:3.03mmol/L、2.78mmol/L和2.29mmol/L,说明桑黄多糖对高胆固醇症状有较好的调节作用。桑黄多糖组在给药21d后,小鼠的高密度脂蛋白水平都有极显著的上升,其高密度脂蛋白的含量分别为:1.29mmol/L、1.54mmol/L和1.44mmol/L,结果表明桑黄多糖对糖尿病所引起的脂代谢异常具有改善作用。
4.桑黄多糖分散片的制备及质量控制。以崩解时限为指标,采用单因素考察和正交设计实验,对桑黄多糖分散片处方及制剂工艺进行筛选、优化。最优处方和工艺是50%微晶纤维素(MCC)为填充剂,50%的乙醇溶液为粘合剂,20%低取代羟丙基纤维素(L-HPC)为崩解剂,硬脂酸镁为润滑剂,湿法制粒。制备的分散片每片含桑黄多糖50mg,崩解时间为45s,45min溶出量为标示量的75.30%,符合2010版中华人民共和国药典对分散片的要求。