芝麻素对人肺腺癌A-549细胞影响的研究

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目的:探讨原芝麻素对人肺腺癌A-549细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用及其机制,为开发抗肿瘤中药提供实验和理论依据方法:采用体外细胞培养方法培养人肺腺癌A-549细胞;应用MTT法测定原芝麻素对人肺腺癌A-549细胞株的抗增殖及细胞毒性作用;应用倒置显微镜、HE染色法来观察肿瘤细胞的形态学变化;应用流式细胞术(Flowcytometry, FCM)分析细胞周期分布和凋亡情况;AnnexinV/PI双标法分析细胞凋亡率;测定细胞Bcl-2及Bax表达水平;应用免疫细胞化学技术检测药物作用前后凋亡蛋白激酶Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达变化并探讨芝麻素对人肺腺癌A-549细胞株的抑制增殖和诱导凋亡的作用机制。结果:(1)MTT法检测结果表明:10μm/ml-80μg/ml芝麻素对人肺腺癌A-549细胞株均有明显抑制作用,且呈现出浓度和时间依赖性;(2)形态学观察:倒置显微镜观察发现实验组细胞体积变小变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;HE染色结果发现实验组细胞质脱水浓缩,伊红染色增强等典型的细胞形态学变化;(3)流式细胞仪分析结果:40μg/ml药物作用48h后,出现明显的细胞凋亡峰,且S期细胞明显增多,而G期细胞明显减少,多数细胞阻滞在S期;Bcl-2蛋白的表达降低, Bax蛋白的表达升高。(4)免疫细胞化学(SABC法)检测发现实验组细胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达增加与对照组相比较均有显著差异(P<0.01)。结论:1、芝麻素对人肺腺癌A-549细胞株具有抑制增殖作用,并呈浓度和时间依赖性佳。2、芝麻素诱导凋亡作用机制可能与细胞周期发生S期阻滞有关。3、芝麻素由死亡受体通路和线粒体通路共同完成凋亡的启动和执行。4、芝麻素具有显著的抗肿瘤作用,有望开发成一种新的抗肿瘤药物或辅助药物。
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