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目的:探讨Keap1/Nrf2(kelch-like epichlorohydrin-associated protein 1/nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2)通路在姜黄素(curcumin,Cur)对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)损伤的抗氧化作用。方法:体外培养16HBEC细胞,以CSE进行刺激,模拟慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)氧化/抗氧化失衡过程,利用姜黄素抑制该过程发生,探讨姜黄素保护上皮细胞氧化损伤的作用。CCK-8检测CSE(1%、2%、4%、6%、8%、10%)及姜黄素(0μmol/l、3μmol/l、5μmol/l、7μmol/l、10μmol/l)在不同时间(24h、48h、72h)对细胞增殖的影响,并选取姜黄素及CSE作用于16HBEC的最适浓度及时间。RT-PCR检测Keap1 m RNA、Nrf2 m RNA、HO-1m RNA、NQO1 m RNA转录水平。Western Blotting检测Keap1、Nrf2、HO-1、NQO1的蛋白表达。结果:CSE抑制16HBEC的增殖(P<0.05)。随着时间梯度及浓度梯度增加,CSE抑制16HBEC增殖程度增加(P<0.05)。计算出CSE作用于16HBEC 48h时IC50浓度(对细胞50%抑制的浓度)为2.21%,后续实验均选用2%作为CSE的干预浓度。Cur作用16HBEC细胞48 h,当浓度<5μmol/l,Cur对16HBEC的增殖无显著影响,当浓度超过7μmol/l时,对16HBEC的增殖抑制作用显著(P<0.01),故选择5μmol/l作为后续实验中的干预浓度。2%CSE处理16HBEC 48 h后,细胞形态改变,造成细胞损伤,5μmol/l Cur预处理16HBEC 12 h后予2%CSE刺激16HBEC,细胞损伤减轻,姜黄素可以缓解CSE导致的16HBEC损伤。CSE导致Nrf2 m RNA与其下游的HO-1 m RNA、NQO1 m RNA表达下降,Cur诱导Nrf2 m RNA及其下游的HO-1 m RNA、NQO1 m RNA表达增加(P<0.05)。CSE导致Nrf2与其下游的HO-1、NQO1蛋白表达下降,Cur抑制Keap1蛋白表达,从而使Nrf2及其下游的HO-1、NQO1蛋白表达增加。结论:CSE抑制16HBEC细胞的增殖,且与浓度及时间成正相关。姜黄素通过激活Keap1/Nrf2通路抑制CSE导致的人支气管上皮细胞氧化损伤。