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目的:本课题应用D-半乳糖衰老小鼠模型,观察益髓灸处方对D-半乳糖衰老小鼠海马、大脑皮质中SOD2、GADD45及其mRNA表达和神经元细胞凋亡或坏死的影响,比较足三里配悬钟、百会配关元两组穴位处方抗氧化延缓脑衰老效应,探讨其作用机制,为临床综合防治脑衰老提供实验依据。方法:SPF级雄性昆明小鼠60只,随机分为5组,生理组、模型组、艾炷灸“足三里+悬钟”穴组(简称艾灸1组)、艾炷灸“百会+关元穴”组(简称艾灸2组)、非穴位组(“腕上+髌上”),每组12只。模型组和各艾灸组以D-半乳糖120mg/kg/d颈背部皮下注射,连续70天,同时生理组颈背部皮下注射等量的生理盐水70天。造模第13天三组艾灸治疗组开始艾灸,每次每穴三壮,艾灸1组与非穴位组每次灸单侧两穴,进行左右交替,共6壮,每次疗程为58天。生理盐水组及造模组不做任何治疗性干预,给予与各治疗组同时间、同程度的刺激。治疗结束后,断头取脑,制备脑组织切片用免疫组化检测脑组织SOD2、GADD45蛋白水平,HE染色法电镜下监测神经元细胞形态;制备脑组织匀浆行RT-PCR检测SOD2、GADD45的mRNA表达情况。结果:(1)免疫组化检测:与生理组比较,模型组SOD2、GADD45的表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,艾灸1组和艾灸2组SOD2、GADD45的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与非穴位组比较,艾灸1组和艾灸2组SOD2、GADD45的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)RTPCR检测:与生理组比较,模型组SOD2mRNA、GADD45mRNA的表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,艾灸1组和艾灸2组SOD2mRNA、GADD45mRNA的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与非穴位组比较,艾灸1组和艾灸2组GADD45mRNA的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)HE染色:与生理组比较,模型组模型组坏死神经元细胞密度明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,艾灸1组和艾灸2组坏死神经元细胞密度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与非穴位组比较,艾灸1组和艾灸2组坏死神经元细胞密度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)益髓灸处方“足三里+悬钟”和“百会+关元”均能提高脑衰老模型小鼠的抗氧化能力。(2)益髓灸防治脑衰老的作用机制可能是通过提高SOD2,GADD45表达,抑制神经元坏死,发挥抗氧化应激损伤的作用。