PARP-1及AMPK/mTOR通路介导的自噬对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤放射敏感性影响的研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caiql
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分放射致鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤自噬过程与PARP-1关系的探讨【目的】探讨放射是否可致鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤发生自噬,及PARP-1与放射致自噬的关系。【方法】1.将CNE-2细胞接种于裸鼠皮下,成瘤后分为2组:0Gy组及10Gy组,10Gy组接受10Gy照射剂量,采用western blot检测两组裸鼠移植瘤PARP-1、LC3II及P62的表达,明确放射是否可致裸鼠移植瘤发生自噬。2.将PARP-1基因沉默的CNE-2接种于裸鼠,分为CNE-2组、NC组、PARP-1-shRNA组,成瘤后采用RT-qPCR及western blot检测PARP-1的表达,验证PARP-1的沉默效果。3.CNE-2组、NC组、PARP-1-shRNA组裸鼠均接受10Gy照射剂量,采用western blot检测PARP-1、LC3II及P62的表达,明确PARP-1与自噬关系。【结果】1.与0Gy组比较,10Gy组PARP-1、LC3II表达增多,P62表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。2.与CNE-2组及NC组比较,PARP-1-shRNA组PARP-1的mRNA、蛋白表达均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。3.经10Gy照射后,与CNE-2组及NC组比较,PARP-1-shRNA组PARP-1、LC3II表达减少,P62表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】放射可致鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤发生自噬,且PARP-1是自噬的上游调控点。第二部分PARP-1通过AMPK/mTOR通路介导鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤放射后自噬的发生【目的】探讨PARP-1是否通过AMPK/mTOR通路调节鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤发生自噬。【方法】将裸鼠分为0Gy组、10Gy组、AICAR+10Gy组、Compound C+10Gy组、PARP-1-sh RNA+10Gy组。后4组均接受10Gy照射剂量,其中AICAR+10Gy组、Compound C+10Gy组分别给予腹腔注射AICAR及Compound C,PARP-1-sh RNA+10Gy组接种PARP-1沉默的CNE-2细胞。采用western blot检测PARP-1、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-P70S6K、P70S6K、LC3II及P62的表达变化。【结果】1.与0Gy组比较,10Gy组PARP-1、p-AMPK/AMPK、LC3II表达增加,p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K及P62表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。2.与10Gy组比较,AICAR+10Gy组p-AMPK/AMPK、LC3II表达增加,p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K及P62表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。PARP-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。3.与0Gy组比较,Compound C+10Gy组、PARP-1-sh RNA+10Gy组p-AMPK/AMPK、LC3II、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K及P62表达差异无统计学意义(P>0.05);Compound C+10Gy组PARP-1表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);PARP-1-sh RNA+10Gy组PARP-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】放射后,PARP-1通过AMPK/mTOR通路调节鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤发生自噬。第三部分干扰PARP-1-AMPK/mTOR通路对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响【目的】探讨干扰PARP-1-AMPK/mTOR信号通路对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。【方法】将裸鼠分为0Gy组、PARP-1-sh RNA组、Compound C组、10Gy组、Compound C+10Gy组、PARP-1-sh RNA+10Gy组;后三组接受10Gy照射剂量;PARP-1-sh RNA组、PARP-1-sh RNA+10Gy组接种PARP-1沉默的CNE-2细胞;Compound C组、Compound C+10Gy组给予腹腔注射Compound C。测定移植瘤体增长曲线、瘤体重量,采用免疫组化及western blot检测PARP-1及Bax蛋白的表达。【结果】1.与0Gy组比较,10Gy组、PARP-1-sh RNA组、Compound C组的瘤体体积增长速度较慢,重量较轻,差异有统计学意义(P<0.05);与10Gy组、PARP-1-sh RNA组、Compound C组比较,PARP-1-sh RNA+10Gy组、Compound C+10Gy组的瘤体体积增长速度较慢、重量较轻,差异有统计学意义(P<0.05)。2.与0Gy组比较,10Gy组、Compound C+10Gy组的PARP-1表达增多,差异有统计学意义(P<0.05);10Gy组、PARP-1-sh RNA组、Compound C组的Bax蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。与10Gy组比较,PARP-1-sh RNA+10Gy组、Compound C+10Gy组的Bax表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】干扰PARP-1-AMPK/mTOR通路后,能提高鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性。
其他文献
基层是党执政为民的最前沿,最能显现存在不足之处,也是最能检验国家政策决策的服务实施效果,因此,基层可以说是党执政兴国最根本也是最基本的保障。从某种程度上来说,基层会
业主权增容了建筑物区分所有权的权利主体范围与权利客体范围,是覆盖了建筑物区分所有权内涵的一个法律意义上的概念。业主权契合了"人""权"统一的权利观,符合"权利与义务一
护理记录是医院住院患者医疗文书中的一个重要组成部分,是护士根据医嘱和病情对患者住院期间护理过程的客观反映,它记载了患者住院期间治疗和护理的全过程,反映了病人病情的演变
目的:探讨胃肠息肉摘除术后低血糖反应发生的原因及护理干预措施。方法:将2015年3~11月行胃肠息肉切除术的患者纳入研究,观察患者术后低血糖发生情况。结果:共有281例患者入
科学选材是极为重要的,根据本省和外省青少年击剑运动员的训练、比赛情况以及自身在平时的研究,得出了击剑运动员选材的标准、方法以及选材时应注意的问题。希望对推动击剑运
<正>黄芩汤始载于《伤寒论》,具有清热止痢,和中止痛的功效,用于腹痛下痢,身热口苦,热痢腹痛等症,具有较好的止痛作用。有文献报道,单味甘草蜜炙后,其止痛功效增强,单味白芍
会议
2005年12月31日晚,“2006重庆新年音乐会”曲终人散,乌克兰格里艾尔交响乐团的艺术家们陆续走下台阶,金发碧眼的老外当中,赫然走着一群长着中国脸、说重庆话的年轻乐手……这
国际快递巨头逐鹿中国,合法深入国内电商物流快递市场,不仅带来了新的电子商务物流快递理念、先进的物流快递装备和技术标准体系,还带来了一流的管理经验,并且为培养高素质物
<正> 一般说来,金融软件是指金融机构所使用的应用软件,其范围相当宽。为使讨论的问题更具有针对性,本文为金融软件取一个窄义的概念界定,即核心软件和管理软件。柜台业务、
为了加强商业银行对客户信用风险的事先控制,降低银行运营风险,需要对客户按信用等级进行分类,以便执行不同的信用风险控制策略。文中基于主成分分析法和BP神经网络法,建立了