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气单胞菌(Aeromonas)广泛分布于自然界中,属于条件致病菌,有致病菌株和非致病菌株之分。致病菌株可引起多种水产动物的败血症以及畜禽和人类腹泻,尤其在水产养殖业上危害严重。为研究气单胞菌流行情况,从江苏部分地区淡水鱼养殖场采集样品530份,共鉴定出气单胞菌菌株202株(占38.1%)。基于看家基因gyrB测序,将202株菌株确定到种的水平,包括维氏气单胞菌(A. veronii),嗜水气单胞菌(A. hydrophila),温和气单胞菌(A. sobria),中间气单胞菌(A. media),豚鼠气单胞菌(A. caviae),简达气单胞菌(A. jandaei),杀鲑气单胞菌(A. salmonicida),异嗜糖气单胞菌(A.allosaccharophila),双壳类气单胞菌(A. bivalvium)和动物气单胞菌(A. bestiarum),检出率分别为69%,10%,11%,4%,2%,1%,1%,1%,0.5%和0.5%。维氏气单胞菌是最常见的种。高达70%(14/20)的嗜水气单胞菌从病鱼分离到的。选取气单胞菌的5种主要胞外毒力因子气溶素(aer)、细胞兴奋性肠毒素(alt)、细胞毒性肠毒素(act)、温敏胞外蛋白酶(eprCAI)和丝氨酸蛋白酶(ahp),进行PCR检测。结果显示,alt和act检出率最高,分别为85%和87%,其它3种基因分别为aer(47%),eprCAI(44%)和ahp(51%)。来自水体、病鱼和健康鱼的菌株,5种毒力基因分布的差异没有统计学意义。202株中有201株被检测出至少有1种毒力基因。202株中,19株(9.4%)含有5种毒力基因,其中10株来自发病鱼,而且这10株中有9株被鉴定为嗜水气单胞菌。以斑马鱼为模型,对5种毒力基因均含有的菌株,进行LDso的测定,结果显示来自发病鱼的菌株,其LD5os明显低于来自健康鱼及水体的菌株。以上结果可以看出,不同来源的气单胞菌菌株,毒力基因携带率均较高,具有潜在的致病意义。采用ERIC-PCR和外膜蛋白SDS-PAGE两种分型方法对嗜水气单胞菌09-11年分离菌株及实验室保存菌株共54株进行分型。结果显示54株嗜水气单胞菌采用2种分型方法均能得到多态性较好的指纹图谱。ERIC-PCR能扩增出2至6个大小在600bp到4000bp之间的条带,把54株嗜水气单胞菌分为4群和8类,不同年代及地理位置分别有聚成一类的趋势。外膜蛋白SDS-PAGE显示出3至6个大小在22kD到51kD之间的条带,将54株嗜水气单胞菌分为4群和7类。两种分型方法均体现较好的分型能力,但相关性不明显。两种分型结果与菌株的致病力有一定的相关性。外膜蛋白分型相比ERIC-PCR分型,条带较少,重复性和稳定性更好,分辨力较高,但其操作比较繁琐,对于大量细菌分型往往需要较长的时间,可作为实验室对细菌分型的参考方法；ERIC-PCR分型快速简单,且具备其他分子分型不要求模板序列已知而直接进行扩增的优点,适用于大量嗜水气单胞菌的快速分型研究。在嗜水气单胞菌5种主要胞外毒力因子气溶素(aer)、细胞兴奋性肠毒素(alt)、细胞毒性肠毒素(act)、温敏胞外蛋白酶(eprCAI)和丝氨酸蛋白酶(a助)检测基础上,选取含有5个毒力基因的3个代表菌株(NJ-35、XX-52、CS-43)和少1个ahp基因的菌株XY-16,进行生化试验、溶血性、溶蛋白性、主要外膜蛋白(MOMP)图谱分析及斑马鱼致病性试验。结果显示：4个菌株生化结果完全相同,均溶血、溶蛋白;NJ-35、XX-52、CS-43和XY-16的MOMP条带高度相似,与J-1株目比,蛋白条带更加清晰,说明J-1株相关条带蛋白浓度较低；NJ-35、XX-52、CS-43和XY-16菌体均能够产生致病作用,导致斑马鱼死亡,其LD50分别为1.5×102CFU/mL、1.3×103CFU/mL、2.5×103CFU/mL和6.9×102CFU/mL.说明4个代表菌株毒力较强,均属强毒株,特别是NJ-35的毒力最强。本试验为嗜水气单胞菌致病机制研究和疫苗研制提供了候选菌株。