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目的: 研究鱼藤素通过调节NEK2蛋白抑制胃癌细胞的EMT转化和侵袭转移作用及相关机制。 方法: 1.采用不同浓度的鱼藤素刺激胃癌细胞系MGC-803和SGC-7901细胞系,然后采用细胞划痕以及Transwell细胞侵袭实验研究鱼藤素对胃癌细胞侵袭/转移的抑制作用。同时采用 Western blot方法研究鱼藤素对 EMT转化过程中上皮细胞标记物E-cadherin和间质细胞标记物Vimentin蛋白表达量进行检测。 2.通过RT-PCR及Western blot方法检测不同浓度鱼藤素对细胞NEK2蛋白以及mRNA表达量的影响。 3.采用细胞划痕及细胞侵袭实验研究NEK2对胃癌细胞侵袭/转移作用的影响。 4.通过RT-PCR方法研究鱼藤素处理的NEK2过表达的MGC-803和SGC-7901细胞系E-cadherin以及Vimentin mRNA的表达水平。 结果: 不同浓度的鱼藤素一起培养胃癌细胞系MGC-803和SGC-7901细胞24h后,随着鱼藤素浓度的增加,NEK2蛋白表达量逐渐降低。鱼藤素可以抑制胃癌细胞的侵袭和转移作用,同时,鱼藤素可以抑制胃癌细胞的 EMT过程,增加上皮细胞标记物E-cadherin并减少间质细胞标记物Vimentin的表达量。沉默NEK2可以抑制胃癌细胞的侵袭和转移过程和EMT转化。在胃癌细胞中过表达NEK2后,然后用50μM的鱼藤素处理细胞,通过RT-PCR方法检测E-cadherin和Vimentin mRNA的表达水平,证实过表达NEK2可以抵消鱼藤素对胃癌EMT转化的抑制作用。 结论: 1.鱼藤素可以抑制肿瘤细胞的侵袭/转移过程并调节EMT过程。抑制NEK2可以抑制胃癌细胞的侵袭/转移和EMT转化。 2.不同浓度鱼藤素可以逐渐降低NEK2表达水平。 3.过表达NEK2可以抵消鱼藤素对胃癌肿瘤细胞EMT转化的抑制作用。