组织工程材料KLD-12多肽/TGF-β1纳米纤维凝胶复合BMSCs治疗椎间盘退变效果的实验研究

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目的:探讨组织工程材料KLD-12多肽/TGF-β1纳米纤维凝胶复合BMSCs治疗椎间盘退变的效果。方法:选取健康新西兰大白兔40只,随机平均分为A、B、C、D、E五组,其中A、B、C、D四组兔行纤维环穿刺髓核抽吸法建立兔椎间盘退变模型(L3-4、L4-5、L5-6),术后两周将KLD-12多肽/TGF-β/BMSCs凝胶、生理盐水、KLD-12多肽/BMSCs凝胶、KLD-12多肽/TGF-β1凝胶40μl分别原位植入退变椎间盘,E组不做任何处理。移植术后4周,8周,12周,24周每组随机抽取2只兔行X线及MRI影像学检查,之后收集兔椎间盘标本经行大体观察、HE染色、半定量RT-PCR检测椎间盘CollagenⅡ及Aggrecan m RNA表达,观察各组之间椎间盘变化。结果:X线片检查,各个时间点%DHI与A组相比:B、C、D组4周、8周、12周、24周均降低,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。MRI检查T2加权信号强度,与A组相比,C、D组略降低,B组明显降低,E组明显最高。与A组相比:B、C、D、E组4周、8周、12周、24周差异具有统计学意义(P﹤0.05)。大体标本观察,A组可见新生髓核样组织;B组中央髓核组织缺失,可见灰黄色的纤维样增生组织;C组椎间隙稍狭窄,中央髓核区可见白色纤维样增生组织,质地较韧,外周纤维环结构稍紊乱;D组可见少量新生髓核样组织。HE染色,据椎间盘退变组织学分级:A组1~2级,B组4~5级,C组3~4级,D组2~3级,E组~0级。甲苯胺蓝染色,A组髓核组织甲苯胺蓝深度染色,B组髓核组织甲苯胺蓝染色部分髓核组织缺失,不着色,局部淡染;C组和D组髓核组织甲苯胺蓝中度染色;E组:髓核组织甲苯胺蓝深度染色。Aggrecan m RNA,A组~E组均有表达,A组与分别B、C、D组比较,各个时间点表达显著升高,差异具有统计学意义(P﹤0.05);A组与E组比较,表达显著降低,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。CollagenⅡm RNA,A组~E组均有表达,A组与分别B、C、D组比较,各个时间点表达显著升高,差异具有统计学意义(P﹤0.05);A组与E组比较,表达显著降低,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。结论:KLD-12多肽/TGF-β1复合BMSCs移植对退变椎间盘具有一定的修复和再生作用。
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