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目的:确定抗慢性阻塞性肺病(hronic obstructive pulmonary disease,COPD)的瘤果黑种草子(nigella glandulifera seeds,NGS)有效部位黄酮和挥发油的最优组合,并探索其抗COPD的效应及作用机制。方法:1)采用固定剂量法观察瘤果黑种草子黄酮和挥发油组合物(nigella glandulifera seeds flavonoids and volatile oil composition,NFVC)的急性毒性反应;2)于小鼠足趾注射角叉菜胶,观察NFVC抑制小鼠足趾肿胀度的影响;于大鼠足趾注射弗氏佐剂,观察NFVC对抑制大鼠足趾肿胀程度的影响;采用脂多糖(lioPosacchrid,LPS)诱导RAW264.7体外炎症模型,观察NFVC对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7分泌白介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、一氧化氮(nitric oxide,NO)炎症因子水平的影响;采用乙酰胆碱(acetylcholine chloride,Ach)和组胺(histamine,His)所致豚鼠离体气管环平滑肌痉挛,观察NFVC对离体豚鼠气管平滑肌解痉作用的影响。通过上述整体动物实验,细胞实验,动物离体组织实验,筛选出瘤NFVC最优组合;3)采用气管内滴入LPS加烟熏建立大鼠COPD模型,观察大鼠的一般状况,肺组织的病理改变,进行支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和血液炎性细胞分类,采用ELISA法测分别定BALF和血液中的IL-8、γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-10(Interleukin-10,IL-10)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的含量水平以及血液中的α1-抗胰蛋白酶、纤维链接蛋白含量;采用流式细胞仪检测血液中不同类型的T淋巴细胞:Th1、Th2、Th17及Treg淋巴细胞。结果:1)NFVC无明显急性毒性;2)与单剂量黄酮组和挥发油组比较,NFVC200:40mg/kg剂量组(即200mg/kg黄酮加40mg/kg挥发油)抑制角叉菜胶致小鼠足跖肿胀度明显(P<0.01);NFVC140:10mg/kg、140:20mg/kg剂量组抑制佛氏完全佐剂致大鼠足趾肿胀度明显(P<0.01);NFVC80:12.5μg/ml、80:25μg/ml剂量组抑制RAW264.7释放NO、IL-8、IL-6等炎症细胞因子作用明显(P<0.01);NFVC1:10mg/ml、2:5mg/ml剂量组降低Ach和His致豚鼠气管平滑肌收缩张力作用明显(P<0.01);3)NFVC与黄酮组、挥发油组比较:改善COPD模型大鼠活动少、饮食饮水减少等精神状态,对其肺组织的病理变化有不同程度的减轻;血清中IL-4、IL-8、IL-17、纤维链接蛋白的含量水平均降低(P<0.05),IL-10、α1-抗胰蛋白酶的含量水平均升高(P<0.05),白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数量下降(P<0.05),Th1、Th17淋巴细胞比例下降(P<0.05);BALF中IL-4、IL-8、IL-17的含量水平均降低(P<0.05),白细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞数量下降(P<0.05)。结论:NFVC70:20mg/kg、140:10mg/kg、140:20mg/kg对角叉菜胶和佐剂性关节足趾肿胀有抑制作用,对RAW264.7细胞释放IL-8、IL-6和NO有抑制作用,缓解豚鼠支气管痉挛,结果提示为最优组合物的配比剂量。NFVC140:20mg/kg剂量组具有较好的抗COPD的作用,其作用机理可能与抑制中性粒细胞及以Th1、Th17为主的T淋巴细胞,阻止RAW264.7细胞释放IL-8、IL-6减缓炎症反应;增加α1-抗胰蛋白酶的含量,减轻气道的炎症刺激,减缓小、细支气管结构重建和肺大泡的形成有关。