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皱叶留兰香(Mentha crispata)为唇形科薄荷属多年生宿根性草本植物,植株体内含有酯类、醇类、醛类、酮类等挥发性芳香物质,留兰香提取精油可广泛应用于医药、食品生产、日用化工等方面具有广泛的应用价值,市场前景良好。本文以茎段扦插繁殖、腋芽繁殖、愈伤组织分化三种快速繁殖方式建立了皱叶留兰香再生体系,并利用GC-MS技术对皱叶留兰香栽培苗与愈伤组培苗挥发油化学组分进行分析。旨为皱叶留兰香的种植、开发与利用提供理论依据与技术支撑,本文获得的主要研究结果如下:1.茎段繁殖:以皱叶留兰香茎段进行扦插繁殖,结果表明:采用50mg/LNAA处理30min对茎段扦插生根率可达100%。2.腋芽繁殖:以皱叶留兰香茎段为外植体进行不同方式的灭菌处理。实验结果表明:最佳外植体灭菌方法为:先用0.5%洗衣粉溶液浸泡5min,然后流水下冲洗1～2h,再用70%乙醇灭菌30s,然后0.1升汞灭菌8min。采用此灭菌方法效果最好,污染率为25%,发芽率达71.67%。皱叶留兰香腋芽茎段增殖培养基以MS+琼脂7.5g/L+蔗糖30g/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L为最适宜培养基配方。芽苗增殖系数达3.1腋芽萌发早,有效芽苗数多且生长健壮,芽苗高度为3.5cm。3.愈伤组织诱导与再生体系建立:皱叶留兰香愈伤组织诱导的最佳外植体为尖端茎段,最佳愈伤诱导培养基为MS+TDZ2mg/L琼脂6.5g/L+蔗糖30g/L+25%椰汁,愈伤组织诱导率达99.05%,最佳愈伤分化增殖培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖30g/L,愈伤分化率为58%。最佳愈伤培养条件为接种后先置于黑暗条件暗培养7d然后再进行光照,培养温度(25±1)℃,光照强度2000～25001x,光照时间16 h/d,黑暗8 h/d,相对湿度70%～80%。4.生根培养与炼苗移栽:皱叶留兰香较易生根,低浓度的激素即可以使皱叶留兰香生根。1/2MS+琼脂7.0g/L+蔗糖20g/L+IBA0.5mg/L为皱叶留兰香生根的最佳培养基。生根率可达100%。炼苗移栽最适宜的移栽基质为细沙土:珍珠岩:腐殖土(2:1:1)。成活率可达99%。5.挥发性精油提取与GC-MS分析:分别以温室培养的皱叶留兰香栽培苗(A)与愈伤组织培养产生的组培苗(B)为实验材料,用水蒸气蒸馏法提取植株内的精油(挥发油)成分,利用行GC-MS气相色谱-质谱分析,其中温室栽培苗(A)提取的挥发油鉴定出25种化学成分,而愈伤组培苗(B)提取的挥发性油鉴定出30种化学成分。两种皱叶留兰香共有的化学成分有19种。最主要的化学成分有香二氢香芹酮、乙酸香芹酮、荜澄茄油萜,β-水芹烯、α-蒎烯、β-月桂烯、β-石竹烯、植物醇、d-柠檬烯等。