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目的:
(1)优化茉莉花中总黄酮的提取工艺。
(2)探讨茉莉花提取物对大鼠离体胸主动脉的舒张作用与机制。
方法:
(1)以芦丁为标准品计算总黄酮含量,通过单因素试验和正交试验考察不同因素和水平对提取工艺的影响。
(2)大鼠胸主动脉环张力测定法。
(3)激光共聚焦扫描显微镜技术。
结果:
(1)最佳提取工艺为料液比为1:20,90℃水浴温度,乙醇浓度为65%,每次1h,回流提取2次。
(2)茉莉花三部分提取物,即乙酸乙酯水溶部(wmersoluble pan in acetic ethe fraction of jasmine,WSJ)、乙酸乙酯水不溶部(waterinsoluble part in acetic ethe fraction of jasmine,WISJ)、总黄酮部(total flavonoidsof iasmine,FFJ),均能明显舒张离体大鼠胸主动脉环,并呈浓度依赖性。在内皮完整血管上,WSJ、WISJ和TFJ能浓度依赖性地降低苯肾上腺素(PE:10gmol·L。)预收缩血管的张力,使最大舒张幅度分别为102±2.6%、96±3.1%和105±3.2%,也能浓度依赖性地降低氯化钾(KCl:60 mmol·L-1)预收缩血管的张力,使最大收缩幅度分别降低78±9%、103±3.6%和78±6.5%;一氧化氮合酶抑制剂L—NAME明显削弱WISJ的舒血管作用,使血管环的最大收缩幅度降低31%(P<0.01);钾通道阻断剂4—AP能明显削弱WSJ或WISJ的舒血管作用,使血管环最大舒张幅度分别降低47%或39%,与对照组相比有统计学差异(P<0.01);钾通道阻断剂BaCl2能明显削弱WISJ或TFJ的舒血管作用,使血管环最大舒张幅度分别降低18%或68%,与对照组相比有统计学差异(P<0.01);钾通道阻断剂TEA均能明显削弱WISJ的舒血管作用,使血管环最大舒张幅度降低35%,与对照组相比有统计学差异(P<0.01);钾通道阻断剂Gli能明显削弱TFJ的舒血管作用,使血管环最大舒张幅度为27%,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。在无钙环境下,WSJ、WISJ或TFJ能抑制PE(10}μmol/L)引起的去内皮主动脉环的短暂收缩(P<0.01),使血管环最大收缩幅度分别降低46%、52%或30%,与对照组相比有统计学差异(P<0.01);也能抑制高钾(KCL 60mmol·L-1)环境下累计加入CaCl2(0.5—8 mmol/L)的引起的血管收缩,使血管环最大收缩幅度分别降低为29%、71%或65%,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。
(3)激光扫描共聚焦检测细胞内钙的结果表明,WSJ(3g/L,6g/L)、WISJ(1g/L,2g/L)和TFJ(4g/L,8g/L)浓度依赖性地降低了KCl除极诱导的平滑肌细胞胞浆内钙的升高幅度,Fmax/F0值分别降低WSJ(0.5,1.4)、WISJ(1.0,1.5)和TFJ(0.8,1.3),与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。
结论:在最优条件下茉莉花总黄酮提取率为2.86%,该提取工艺合理、高效、简单;茉莉花提取物能够浓度依赖性舒张大鼠胸主动脉环,其机制可能与其促进NO释放、激活多个K+通道并最终减少细胞内钙离子浓度有关。