结直肠癌患者循环肿瘤细胞及Twist表达与肝转移相关性研究

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目的:本研究通过分析结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)肝转移患者外周血扩增型循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells,CTCs)与Twist表达水平;分析扩增型CTCs和Twist与结直肠癌临床病理特征的相关性,旨在探讨扩增型CTCs与Twist可否作为结直肠癌肝转移风险的预测指标。方法:采集南昌大学第二附属医院2019年9月至2019年11月期间入院治疗的53例结直肠癌患者和5例健康体检者的血液样本,将其分为结直肠癌肝转移组、结直肠癌无肝转移组和健康对照组。采用Cyttel~?技术阴性富集方法进行细胞富集,用im-Fish鉴定技术鉴定扩增型循环肿瘤细胞及免疫荧光蛋白检测技术检测Twist表达。该研究中所有数据使用IBM SPSS 26.0统计软件进行统计分析。计量资料采用独立样本t检验,计数资料采用?~2检验或Fisher精确概率法,相关分析采用Spearman等级相关分析,检验水准设为0.05,ROC曲线用来进行诊断价值比较。结果:1、扩增型CTCs、Twist以及扩增型CTCs联合Twist检测在结直肠癌患者与健康对照组之间均有显著差异(P<0.01),CRC患者扩增型CTCs阳性率高于健康体检者(84.9%VS0%),CRC患者Twist表达水平明显高于健康体检者。扩增型CTCs联合Twist检测灵敏度高于单纯扩增型CTCs检测(94.3%VS84.9%)。2、结直肠癌肝转移患者Twist阳性细胞数大于结直肠癌无肝转移患者(2.13±2.19VS0.48±0.63,P=0.01)。Twist在预测结直肠癌肝转移诊断价值(AUC=0.749,95%CI:0.606-0.887)高于扩增型CTCs(AUC=0.394,95%CI:0.239-0.550)和扩增型CTCs联合Twist检测(AUC=0.555,95%CI:0.395-0.714);表达Twist细胞数与结直肠癌淋巴结转移(0.20±0.42VS0.63±0.68,P=0.046)相关,有淋巴结转移患者的外周血Twist阳性细胞数低于无淋巴结转移。而CRC肝转移与CRC未发生肝转移之间扩增型CTCs数(3.25±2.47VS3.97±2.15,P>0.05)和检出率(79.2%VS89.7%,P>0.05)均无明显差异。3、扩增型CTCs联合Twist检测在左半结肠癌检出率高于右半结肠癌(100%VS85%,P=0.049)。扩增型CTCs及Twist与性别、年龄、肿瘤位置无明显相关性。4、CRC低分化患者扩增型CTCs数高于中分化患者扩增型CTCs(6.25±1.71VS3.60±2.00,P=0.043),扩增型CTCs细胞数与结肠癌分化程度呈正相关(相关系数rs=0.451,P=0.014);且CRC低分化患者扩增型CTCs+Twist总细胞数明显高于中分化患者(6.50±1.92VS4.12±2.13,P=0.045),联合检测的总细胞数与结肠癌分化程度呈正相关(相关系数rs=0.388,P=0.038)。结论:外周血表达Twist细胞数与结直肠癌肝转移密切相关,与扩增型CTCs相比在结直肠癌肝转移方面具有较高的诊断价值,Twist检测及联合扩增型CTCs检测有望成为结直肠癌的辅助诊断以及预测肝转移风险的优化监控指标。
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