论文部分内容阅读
鹅肉因为其营养价值高、脂肪含量低和不饱和脂肪酸含量高等特点,越来越受到消费者的青睐。动物的产肉力与肌纤维细胞的数量和生长密切相关。骨骼肌纤维是由肌肉细胞增殖和分化形成的,其增殖分化受到多个调控因子的双向调控。其中生肌调节因子家族(Myogenic regulatory factors,MRFs)控制肌细胞的增殖与分化;配对框(Paired box,PAX)家族中的两个转录因子Pax3和Pax7,被认为在肌纤维的生长发育过程中,指导众多过程的形成;最新研究表明,跨膜蛋白8c(Transmembrane protein8c,Tmem8c)能够控制成肌细胞的融合。而这些在鹅骨骼肌发育过程中均研究甚少。本文主要以鹅为研究对象,利用HE(Hematoxylin-eosin staining)染色技术观察了胚胎期胸肌和腿肌发育情况;采用RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)获取Tmem8c基因全长;QRT-PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction)检测发育过程中各基因的表达情况;LRG(Dual luciferase reporter gene)技术预测筛选Tmem8c基因相关的miRNA。结果显示:(1)HE染色表明胸肌和腿肌组织都经历了从成肌细胞到多核肌管再到肌纤维的过程,且腿肌的发育明显早于胸肌;(2)QRT-PCR结果说明MRFs、Pax3和Pax7基因均和鹅骨骼肌的发育相关,并且存在不同的表达规律:MRFs和Pax7基因在E11~E15(Embryonic,胚胎期)期间出现表达高峰期,而Pax3基因在孵化开始即出现高表达,随后表达下降,通过分析表明,这些基因的表达规律均和其在肌肉发育过程中的作用密切吻合;(3)鹅Tmem8c基因与其它物种具有很高的同源性,同时具有一些保守性特征;(4)在胸肌和腿肌组织中Tmem8c呈现瞬时峰值表达模式,即在胸肌中E19天表达量达到最大在腿肌中E15天表达量达到最大,在E23天时表达量迅速下降(P<0.05);(5)通过双荧光检测和相关性分析,发现miR-16-1是潜在的能够作用于Tmem8c的miRNA。