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目的探讨色素上皮衍生因子(Pigment epithelium-derived factor, PEDF)对体外培养的人类视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelialium, hRPE)细胞生长周期的影响及其可能作用机制,为PEDF临床应用提供实验依据。方法采用MTT法检测不同浓度的PEDF和不同作用时间下体外培养的hRPE细胞的吸光度(A值),绘制生长曲线;采用流式细胞术检测PEDF对hRPE细胞生长周期变化及细胞周期蛋白Cyclin D1表达的影响,用免疫组化方法检测PEDF对hRPE细胞P16表达的影响。结果1、在不同浓度PEDF作用下,hRPE细胞吸光度(A值)随浓度增加而增加,且与对照组比较差别均有统计学意义(P<0.01),不同浓度组间的差别也均有统计学意义(P<0.01);而50ng/ml PEDF作用下,加药后第二天开始PEDF组A值均高于对照组(P <0.01),48h的促增殖作用最明显。2、PEDF组与对照组比较,细胞周期G0/G1、S、G2/M各期所占比例均发生明显的波动,自12h起,PEDF组G0/G1期逐渐比例减小,S期比例逐渐增大并在48h达高峰,G2/M期比例无明显变化,60h后G2/M期比例上升,S期比例回降。在12h～60h间,G0/G1期细胞数明显低于对照组(P <0.01),S期细胞数明显高于对照组(P <0.01),而G2/M期没有明显变化(P﹥0.05)。3、体外培养的hRPE细胞基础性表达Cyclin D1和P16,PEDF组Cyclin D1表达明显高于对照组(P<0.01),P16表达较对照组有升高,但二者差别无统计学意义(P>0.05)。结论PEDF可促进体外培养的hRPE细胞的生长活力,呈一定的剂量-效应和时间-效应关系;PEDF可上调hRPE细胞Cyclin D1的表达,P16表达升高不明显,其对细胞的抑制作用可能不足以对抗Cyclin D1的促细胞增殖作用,故PEDF对细胞周期仍起正向调控作用,即促进细胞进入S期,从而促进生长。