【摘 要】
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目的:1.总结补肾益精法中药复方治疗系统性硬皮病理论基础及临床应用补肾益精法中药复方辨治系统性硬皮病思路。2.探讨补肾益精法中药复方中熊果酸（UA）、毛蕊花糖苷（AC）、羟基红花黄色素A（HSYA）3个单体对硬皮病血管内皮间质转化（EndMT）的影响,为复方的临床推广提供科学依据,为新药的开发和系统性硬皮病的治疗提供新思路。方法:1.临床研究部分:通过文献收集、分析归纳,立足于邓老“肺脾肾相关”理
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目的:1.总结补肾益精法中药复方治疗系统性硬皮病理论基础及临床应用补肾益精法中药复方辨治系统性硬皮病思路。2.探讨补肾益精法中药复方中熊果酸（UA）、毛蕊花糖苷（AC）、羟基红花黄色素A（HSYA）3个单体对硬皮病血管内皮间质转化（EndMT）的影响,为复方的临床推广提供科学依据,为新药的开发和系统性硬皮病的治疗提供新思路。方法:1.临床研究部分:通过文献收集、分析归纳,立足于邓老“肺脾肾相关”理论,在综述的基础上阐明补肾益精中药复方治疗系统性硬皮病（SSc）的理论基础,并对临床中复方用药特点进行分析,通过个案报道进一步展示应用补肾益精中药复方临床辨治系统性硬皮病,为进一步实验研究提供理论依据。2.实验研究部分:利用TGF-β 1处理人脐静脉细胞细胞（HUVEC）以构建硬皮病EndMT模型;分别用复方中的UA、AC、HSYA3个单体干预,QPCR检测各组细胞CD31、FSP1、Vimentin mRNA表达,WB检测相关蛋白表达。结果:1.临床应用补肾益精法中药复方辨治SSc可改善患者临床症状、改善病情。2.与空白组相比,模型组细胞形态发生改变,同时内皮标志CD31 mRNA显著降低（P<0.05）,间质标志FSP1、Vimentin mRNA均显著升高（P<0.05,P<0.05）。3.QPCR结果显示,与模型组比较,UA24h组、UA48h组细胞CD31mRNA均显著升高（P<0.05,P<0.05）,FSP1 mRNA均显著降低（P<0.05,P<0.05）;Vimentin mRNA均显著降低（P<0.05,P<0.05）;UA48h组细胞FSP1、Vimentin mRNA下降更明显（P<0.05,P<0.05）,UA24h组与UA48h组细胞CD31mRNA无明显差异（P>0.05）。WB显示模型组细胞CD31蛋白表达下降,N-cadherin、Vimentin蛋白明显升高。UA各组CD31蛋白表达均升高,N-cadherin、Vimentin蛋白均下降,其中UA 24h组、UA48h组两组CD31蛋白升高幅度相当,UA48h组N-cadherin、Vimentin蛋白下降明显。4.与模型组比较,AC24h组、AC48h组细胞CD31 mRNA均显著升高（P<0.05,P<0.05）;FSP1 mRNA表达均显著降低（P<0.05,P<0.05）;Vimentin mRNA均显著性降低（P<0.05,P<0.05）;AC24h组FSP1 mRNA降低更明显（P<0.05）,AC两组细胞CD31、VimentinmRNA无明显差异（P>0.05,P>0.05）。WB结果显示,AC各组CD31蛋白表达均略高于模型组,AC24h组增加明显;AC干预后N-cadherin蛋白表达不同程度下降,其中AC48h组下降明显;模型组Vimentin蛋白表达低于空白组,AC24h组Vimentin蛋白略低于模型组,AC48h组略高于模型组。5.QPCR结果显示,与模型组比较,HSYA24h组、HSYA48h组细胞CD31 mRNA均显著升高（P<0.05,P<0.05）,FSP1 mRNA均显著降低（P<0.05,P<0.05）;Vimentin mRNA亦均显著性降低（P<0.05,P<0.05）;较HSYA24h组,HSYA 48h组CD31 mRNA升高明显（P<0.05）,Vimentin mRNA降低更明显（P<0.05）,而HSYA24h组FSP1 mRNA表达较HSYA 48h组显著降低（P<0.05）。WB结果显示,对比空白组,模型组CD31、E-cdherin蛋白下降,N-cadherin蛋白升高;HSYA24h组CD31蛋白低于模型组,HSYA 48h组CD31蛋白显著高于模型组。HSYA 24h、HSYA 48h组E-cadherin蛋白高于模型组,SYA 48h组升高明显。HSYA两组N-cadherin蛋白表达与模型组相比无明显差异。结论:1.临床上应用补肾益精法复方辨治SSc,可以改善患者病情,有较好的临床疗效。2.补肾益精中药复方中UA、AC及HSYA 3个单体可以升高内皮间质标志物表达,降低间质标志物的表达,对硬皮病EndMT均有抑制作用,可用于进一步研究。
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