黄伞胞内与胞外多糖提取优化与抗氧化活性研究

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黄伞( Pholiota adiposa )隶属担子菌亚门( Basidiomycotina ),伞菌纲(Agaricomycetes),伞菌目(Agaricales),球盖菇科(Strophariaceae)。富含多糖、蛋白质、微量元素、食用纤维和维生素等生物活性物质。黄伞多糖是黄伞主要的活性成分之一,具有降血脂、抗肿瘤、抗菌、抗疲劳、增强免疫力等多种药理活性。本文对黄伞SX-02通过PB试验和响应面试验等方法确定了黄伞胞外多糖(Exopolysaccharide, EPS)与胞内多糖(Intracellular polysaccharide, IPS)的最佳提取条件,并初步分析了其抗氧化能力,得到以下结论:1、IPS的最佳提取条件响应面优化结果为超声破壁功率561.26W,沉淀时间30.18h,沉淀pH8.28,此条件下黄伞胞内多糖得率的理论值达20.73%。考虑到操作方便,将最佳提取条件调整为:超声破壁功率560W,沉淀时间30h,沉淀pH8.3。在此条件下,胞内多糖得率为20.70%,稍低于理论值20.73%。2、IPS的体外抗氧化活性测定了IPS对二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)的清除能力,同时用普鲁士蓝法测定还原力。结果表明,IPS有明显抑制O2-·、·OH和DPPH自由基的作用,并具有一定的还原力,呈现量效关系。IPS对O2-·、·OH和的DPPH半数抑制浓度( EC50 )分别为19.61±1.25mg/L、42.37±3.72mg/L和24.83±2.16mg/L。3、EPS的最佳提取条件响应面优化结果为浓缩温度87.36℃,沉淀时间35.18h,pH8.81,此条件下黄伞胞外多糖的理论值达8.45mg/mL。考虑到操作方便,将最佳提取条件调整为:浓缩温度87℃,沉淀时间35h,pH8.8。在此条件下,胞外多糖提取量为8.39g/L,稍低于理论值8.81g/L。4、EPS的体外抗氧化活性测定了EPS对二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)的清除能力,同时用普鲁士蓝法测定还原力。结果表明,EPS有明显抑制O2-·、·OH和DPPH自由基的作用,并具有一定的还原力,呈现量效关系。EPS对O2-·、·OH和的DPPH半数抑制浓度( EC50 )分别为28.65±2.55mg/L、119.24±10.05mg/L和10.85±0.57mg/L。5、EPS的体内抗氧化活性通过测定小鼠心、肝、脾、肾组织和全血的脂质过氧化物含量、谷胱甘肽过氧化物酶及超氧化物歧化酶的活性,观察了EPS对机体各组织及全血抗氧化能力的影响。结果表明,EPS能提高小鼠组织及全血超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并能降低丙二醛(MDA)的含量,提高了机体抗活性氧损伤的能力,为防止或减轻脂质过氧化损伤提供了试验依据。试验结果表明,黄伞胞外多糖与胞内多糖均具有较强的体内和体外抗氧化能力,为黄伞多糖的抗氧化机制及构效关系的深入研究奠定了基础。
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