本文系统研究了四种氨基酸的衍生试剂,比较了氨基酸检测的不同条件,以及通过不同途径验证四种衍生方法,建立了乳粉中必需和半必需氨基酸的HPLC检测方法,并对大宗原料和市售婴儿配方乳粉中必需和半必需氨基酸进行了分析。衍生试剂异硫氰酸苯酯试剂量为200μ1,衍生温度为室温,衍生时间60min,回收率均值在90%～110%；检出限在10～100μg/g；精密度在10%之内；与第三方实验室数据比对,相对误差在10%之内。衍生试剂丹磺酰氯试剂量为1ml,衍生温度为室温,衍生时间15min,回收率均值在90%-110%；检出限在10～100μg/g；精密度在10%之内；与第三方实验室数据比对,蛋氨酸和胱氨酸相对误差在20%之内,其余氨基酸相对误差在10%之内。衍生试剂磺酰氯二甲胺偶氮苯试剂量为100μl,衍生温度为55℃,衍生时间15min,回收率均值在80%左右；检出限在30-200μg/g；精密度在20%之内：与第三方实验室数据比对,相对误差在40%之内。衍生试剂邻硝基苯磺酰氯试剂量为150μl,衍生温度为室温,衍生时间10min,回收率低于80%；检出限在50-400μg/g；精密度高于20%；与第三方实验室数据比对,相对误差在60%之内。异硫氰酸苯酯衍生方法准确,丹磺酰氯衍生方法有待进一步验证,磺酰氯二甲胺偶氮苯和邻硝基苯磺酰氯衍生方法准确性低。本文中建立的衍生方法只比对了一家第三方实验室,可能存在偶然性,有必要扩大验证实验室数量,进一步验证方法准确性,才能应用于国家标准。本文采用异硫氰酸苯酯衍生方法分析了婴儿配方乳粉大宗原料和市售婴儿配方乳粉中的氨基酸,其中70#乳清粉中必需和半必需氨基酸与其他原料差异明显。不论进口产品还是国产产品都没有单独添加单体氨基酸。婴儿配方产品的配方设计需要升级,应考虑产品中必需和半必需氨基酸含量。