老年肾阳虚证的差异基因表达研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:Jordan2391
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目的:利用基因芯片技术研究老年肾阳虚的基因表达差异,探讨老年生理性肾阳虚与衰老的关系。方法:采用美国Afymetrix公司的HG-u133PluS 2.0基因表达谱芯片。按一步法抽取总RNA,分离纯化两种样品的mRNA,经逆转录合成掺入生物素标记的cDNA合成探针,经芯片杂交和洗片后,用荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像。用GeneChip Operating software(GCOS 1.4)分析软件对芯片图像进行分析。把图像信号转化为数字信号。然后dChiD软件做校正和归一化处理。通过芯片数据间的两两比较分析,得到20条共同差异表达基因。通过PubMed数据库搜索共同差异表达基因的所属功能。结果:对芯片进行两两比较分析,挑选差异表达基因。以Ca11在B通道为P,Foldchange≥2为标准,筛选出上调基因;以Call在A通道为P,Fold change≤-2为标准筛选下调基因。实验组Shl和正常对照组h1的芯片数据比较得到678条差异表达的基因。其中上调275条,下调403条。患者Sh2和正常对照组h2的芯片数据比较得到501条差异表达的基因。其中上调273条,下调228条。从shl vs h1和sh2 vs h2中挑选出,在两次比较中Ratio值同时大于2倍或同时小于0.5倍的基因为共同差异表达基因,共有20个。结论:肾阳虚证的发生与多个基因的异常表达有关。
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