超临界技术制备低水溶性药物脂质体实验研究

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超临界逆向蒸发(Supercritical Reversion Phase Evapouration,简称SCRPE)过程,是利用超临界流体的特性开发的制备脂质体的新方法,SCRPE过程在制备低水溶性药物脂质体具有独特的优势:不仅可以避免大量使用有机溶剂,消除对环境的危害,还可以通过调整体系的压力和温度来改变体系的密度(溶剂溶解能力),从而为脂质体的制备及分离处理提供良好的可调性介质,该方法是脂质体技术的一个突破,极大地扩展了超临界CO2的应用领域。本文首先以水溶性药物葡萄糖为研究对象,进行了SCRPE过程制备脂质体的实验研究。采用ZETA电位分析仪、生物传感分析仪、透析法分别对脂质体形态、粒径分布以及对药物包覆率大小进行了表征。考察了过程参数包括温度、压力、平衡时间、磷脂与乙醇用量比、溶液pH值以及胆固醇用量等对脂质体粒径和包覆率的影响规律。在水浴温度60℃,压力25MPa,乙醇用量460μL,磷脂用量0.0361g,胆固醇0.003g,pH=7,葡萄糖溶液0.2mol/L的条件下,制备出了平均粒径分布为365nm,包覆率为39.7%的葡萄糖脂质体。实验结果表明该方法可有效地制备较高包覆率的水溶性药物脂质体。以L-α-Phosphatidylcholine(sigma)磷脂为膜材,以低水溶性抗菌类药物甲硝唑作为被包覆药物,进行SCRPE过程制备甲硝唑脂质体的实验研究。在水浴温度50℃,压力25MPa,乙醇用量230μL,磷脂用量0.0182g,胆固醇0.006g,pH=7,制备出了平均粒径分布为328nm,包覆率为37.2%的甲硝唑脂质体。以抗病毒类药物阿昔洛韦作为被包覆药物,进行SCRPE过程制备阿昔洛韦脂质体的实验研究。在水浴温度40℃,压力25MPa,乙醇用量230μL,磷脂用量0.0187g,胆固醇用量0.0045g,pH=7,条件下制备出了平均粒径332nm,包覆率为27.69%的阿昔洛韦脂质体。以上两种脂质体采用透射扫描电镜、Agilent1100高效液相色谱、ZETA电位分析仪、紫外—可见分光光度计等对制得药物复合脂质体的形态、粒径分布以及对药物包覆率大小进行了表征。考察过程参数包括溶液pH值、磷脂与药物最佳用量比、压力、温度、药物浓度、反应平衡时间、磷脂与胆固醇用量比以及助溶剂浓度等对脂质体粒径及包覆率的影响规律。通过本文的实验研究,不仅对SCRPE过程制备脂质体技术有了较为深入的认识,也对各个操作参数对脂质体的粒径分布和包覆率的影响有了较系统的了解,这为以后的理论研究提供了必要的依据。
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