β-葡萄糖醛酸酶荧光探针的设计、合成与应用

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β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glu)是溶酶体糖苷酶家族的成员,主要参与原核和真核生物糖胺聚糖降解为葡糖醛酸。在各种恶性肿瘤中,肝癌,结肠癌,前列腺癌和肾癌等多种恶性肿瘤中β-Glu活性均高于正常组织,特别是在坏死区域。因此,β-Glu被认为是一种肿瘤生物标志物。此外,人类的β-Glu水平在许多生理疾病中也明显升高。因此,开发一种基于AIE的探针用于各种疾病的诊断和治疗中的实时内源性β-Glu检测具有重要意义。在该论文中,我们基于β-Glu的活性特点,以聚集诱导发光(Aggregation-Induced Emission)材料作为荧光探针的母核构建了荧光探针。我们设计并合成了3个荧光探针,荧光探针Probe-1可能由于四苯乙烯极性太小,硝基苯部分不能离去,导致无法点亮,所以在荧光探针Probe-2的设计上引入了吡啶基团,以增加四苯乙烯母核的极性。但由于吡啶盐的存在影响淬灭效果,使得探针本身就有较强的荧光,酶作用后荧光强度变化不大。从而我们在四苯乙烯的母核上引入硝基苯基团,合成了荧光探针Probe-3。荧光探针Probe-3在检测β-葡萄糖醛酸酶时表现出淬灭荧光的特性。我们继续考察了荧光探针与酶孵育前后的最佳p H、荧光探针与酶孵育的最合适的时间以及不同浓度的酶、荧光探针和氢氧化钠对作用效果的影响,最后我们还探讨了不同构型的荧光探针对检测β-葡萄糖醛酸酶是否有区别。总而言之荧光探针Probe-3是可以用于检测β-葡萄糖醛酸酶的淬灭型荧光探针。
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