肝癌作为全球癌症死亡的第三大原因,具有复发率高,长期生存率低的特点。核受体能够较好的受到小分子药物调节,被认为是肿瘤治疗的理想靶标。NR6A1（Nuclear Receptor Subfamily 6 Group A Member 1）是核受体家族6中的唯一成员,参与调节胚胎发育以及细胞分化等生物学过程。新近的研究初步表明,NR6A1在乳腺癌、前列腺癌以及睾丸生殖细胞瘤中高表达,并与患者的不良预后有关,但迄今关于其在肿瘤中的具体分子作用机制尚不明确。本研究以肝癌为研究对象,探究了NR6A1在肝癌中的表达特征及其所发挥的生物学功能和作用机制。具体工作如下:（1）NR6A1在肝癌中的表达特征及生物学作用通过UALCAN网站分析显示NR6A1在肝癌组织中较正常肝组织高表达。NR6A1高表达的肝癌患者的总体生存期（Overall Survival,OS）和无复发生存期（Recurrence-free Survival,RFS）均降低。蛋白免疫印迹实验证实,与肝正常永生化细胞系相比,NR6A1在多个肝癌细胞系中高表达。利用RNA干扰技术分别敲低肝癌细胞Huh7和QGY-7703中NR6A1的表达,采用CCK8、Ed U、克隆形成实验检测发现,干扰NR6A1使肝癌细胞的增殖明显受到抑制。但划痕实验结果显示,NR6A1不影响肝癌细胞的迁移能力。结果表明NR6A1在肝癌细胞中主要发挥促进细胞增殖的作用。（2）NR6A1通过NDRG1促进肝癌细胞的增殖STRING网站预测NR6A1与NDRG1（N-Myc Downstream-Regulated Gene 1Protein）有较好的关联性。UALCAN网站分析显示NDRG1同样在肝癌细胞中高表达,其高表达会导致肝癌患者的预后不良,且NR6A1与NDRG1的表达呈正相关。通过在人肾上皮细胞系HEK293T细胞中过表达NR6A1,采用免疫共沉淀技术证实,NR6A1与NDRG1存在相互作用。进一步的免疫荧光结合激光共聚焦检测表明NR6A1与NDRG1在Huh7肝癌细胞的细胞核中存在共定位。通过分别对NR6A1进行干扰和过表达,蛋白免疫印迹检测发现,干扰NR6A1之后NDRG1的表达降低,而过表达NR6A1则可上调NDRG1的表达。利用功能拯救实验,即在过表达NR6A1的Huh7细胞中干扰NDRG1,CCK8、Ed U实验结果表明对NDRG1的干扰可以抑制NR6A1过表达造成的肝癌细胞增殖增强的现象。这表明NR6A1通过与NDRG1相互结合,且上调NDRG1的表达来促进肝癌细胞的增殖,发挥促癌作用。（3）NR6A1在肝癌细胞中的高表达受乙酰化调控采用去乙酰化酶抑制剂PXD101（一种泛HDAC家族抑制剂）和NAM（一种泛SIRT家族抑制剂）对Huh7细胞进行处理后发现,在PXD101处理下NR6A1的蛋白和m RNA水平均表达上升,提示NR6A1可能受到去乙酰化酶HDAC家族的影响。然后,采用RNA干扰去乙酰化酶家族中常见分子（HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC6、HDAC10）后发现,敲低HDAC2、HDAC3、HDAC10可使NR6A1的表达上调。考虑到这种表达的上调可能也会受到蛋白直接乙酰化修饰的影响,本研究探索了NR6A1自身的直接乙酰化修饰。采用泛乙酰化抗体（Ac-K）进行免疫共沉淀检测发现,NR6A1自身存在乙酰化修饰。进一步采用免疫沉淀检测了NR6A1与经典的去乙酰化酶（HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC6、HDAC10）之间的相互结合。但遗憾的是,本研究暂时没有找到能与NR6A1相互结合的去乙酰化酶。综上,本研究发现NR6A1在肝癌中高表达且与肝癌患者预后不良相关。NR6A1在肝癌细胞中发挥促癌作用,其机制是通过与NDRG1相互结合,且通过上调NDRG1的表达来促进肝癌细胞增殖来实现。此外,NR6A1在肝癌细胞中的高表达与组蛋白去乙酰化酶HDAC2、HDAC3、HDAC10的调控有关。