论文部分内容阅读
人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)在2型糖尿病的致病过程当中扮演非常重要的角色。研究发现,在超过95%的2型糖尿病人的胰岛组织中发现有hIAPP的聚集物,并且这些聚集物是具有细胞毒性的。从分子水平上了解hIAPP序列聚集性和细胞毒性,将有助于2型糖尿病的治疗方法的开发和研究。 hIAPP的合成是其后续分子学研究的基础。现阶段,多肽合成常用的技术是多肽固相合成(SPPS),但采用线性多肽固相合成的方法合成hIAPP是一个比较艰巨的任务。一方面是因为hIAPP的序列当中存在着一些位阻很大且聚集性非常强的氨基酸残基,另外一方面是因为氨基酸的不完全耦合。由于线性多肽固相合成hIAPP的产率很低,因此需要一种更优的方法用于合成hIAPP。本文当中尝试通过自然化学连接法(native chemical ligation,NCL)来合成hIAPP,即两段侧链去保护的片段以丝氨酸作为连接点形成完整的序列。我们将hIAPP分为两段来进行合成:一段是C端为水杨醛酯结构的hIAPP1-19 SAL-ester;另一段是N端为带有侧链羟基的丝氨酸的hIAPP20-37。两段侧链去保护的片段连接后形成N,O-亚苄缩醛的结构,经酸化处理得到没有二硫键的hIAPP1-37。最后,氧化法形成二硫键得到完整的hIAPP1-37。