草鱼β<,2>m基因的分子克隆与MHC classⅠ多态性分析及其重组蛋白的鉴定

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianming_zhang
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本研究在克隆Ctod-β2m分子基础上,分析了Ctid-MHCⅠ多样性;并对Ctid-MHCⅠ在各组织的表达进行了定量。最后,表达、鉴定了Ctid-MHCⅠ重组蛋白。   本研究首先构建了草鱼cDNA文库。根据动物MHCⅠ轻链基因(β2m)序列设计了兼并引物,从文库中克隆了Ctid-β2m5-端cDNA,再用Anchored-PCR克隆了Ctid-β2m全基因,采用RT-PCR从15尾草鱼分离了其Ctid-MHCⅠ基因;并采用pMALTM-p2X原核系统可溶性表达了Ctid-MHCⅠ,采用QC-RT-PCR法对各组织Ctid-MHCⅠ的表达状况进行了定量,解析了Ctid-MHCⅠ和Ctid-β2m的分子特征,拓展了鱼类MHC的研究,为抗病育种、表位疫苗的研究奠定了基础。
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