肾脏EPO对肉鸡腹水综合征的影响及复方中药的调节作用

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肉鸡腹水综合征(ascites syndrome,AS)是一种常见的营养代谢性疾病,发病原因多种多样,缺氧是始动因素,肺动脉高压是发病机理。促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是主要由肾脏分泌的一种激素,具有促进红细胞生成、调控自噬、抗纤维化等功能。AS发病过程中,EPO参与肺动脉高压形成进而影响AS的发生。本试验旨在研究肾脏EPO及其相关因子在肉鸡AS形成中的作用机制,并观察本课题组筛选的复方中药的作用。方法:以低温(9~11℃)、高钠(饮水添加0.12%Na Cl)、高能(饲料添加3%猪油与4%鱼粉)多因素法复制AS模型。将125羽1日龄肉鸡适应性饲养8 d后,随机分为空白组、AS模型组、复方中药高剂量组(饲喂同AS模型组,饮水添加复方中药2m L/kg·bw·d)、复方中药低剂量组(饲喂同AS模型组,饮水添加复方中药1 m L/kg·bw·d)和L-精氨酸组(L-Arg组,饲喂同AS模型组,日粮添加1%L-Arg),于15、25、35、45日龄每组随机取5羽肉鸡,称重,采血,取心和肾组织样品,观察临床症状和剖检病理变化,计算腹水心脏指数(ascites heart index,AHI),HE染色观察35日龄肉鸡肾组织病理变化,全自动血细胞分析仪检测各日龄肉鸡血液RBC、PCV、Hb,ELISA法检测各日龄肉鸡肾组织HIF-1α、EPO、EPOR、CD131、KIM-1和LC3-Ⅱ蛋白表达量。结果:1、与空白组相比,模型组AS肉鸡精神沉郁,羽毛杂乱,腹部膨大下垂,触摸有波动感;剖检可见腹腔中存在大量黄色液体,肺、肝充血肿大,右心室肥大并有心包积液,肾充血肿大而且有白色沉积物附着,肠壁充血或有大小不一的出血点。与AS模型组相比,复方中药高、低剂量组和L-Arg组肉鸡临床症状和剖检变化均有改善。2、与空白组相比,AS模型组35日龄肉鸡肾组织细胞排列紊乱,肾小管上皮细胞脱落,空泡样变性,间质炎性细胞浸润;与AS模型组相比,复方中药高、低剂量组和L-Arg组均有改善。3、与空白组相比,AS模型组各日龄肉鸡体重显著降低(P<0.01,P<0.05),同时,AHI、血液RBC、PCV、Hb和肾HIF-1α、EPO蛋白表达量显著升高(P<0.01);15日龄肉鸡肾EPOR蛋白表达量显著降低(P<0.01);各日龄肉鸡肾CD131蛋白表达量无显著差异(P>0.05);25、35日龄肉鸡肾KIM-1和25、35、45日龄肉鸡肾LC3-Ⅱ蛋白表达量均显著升高(P<0.01,P<0.05)。4、与AS模型组相比,复方中药高、低剂量组各日龄肉鸡体重显著升高(P<0.01,P<0.05),AHI、血液RBC、PCV、Hb和肾HIF-1α蛋白表达量显著降低(P<0.01,P<0.05);复方中药高剂量组35、45日龄肉鸡肾EPO蛋白表达量显著升高(P<0.01,P<0.05),复方中药低剂量组25、35日龄肉鸡肾EPO蛋白表达量显著降低(P<0.05);复方中药高、低剂量组15日龄肉鸡肾EPOR蛋白表达量显著升高(P<0.05);各组各日龄肉鸡肾CD131蛋白表达量无显著差异(P>0.05);复方中药高、低剂量组25、35、45日龄肉鸡肾KIM-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量显著降低(P<0.01,P<0.05)。5、与AS模型组相比,L-Arg组各日龄肉鸡体重显著升高(P<0.05),AHI、血液RBC、PCV、Hb和肾HIF-1α蛋白表达量显著降低(P<0.01,P<0.05),25、35日龄肾EPO和25、35、45日龄肾KIM-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量显著降低(P<0.01,P<0.05),各日龄肉鸡肾EPOR、CD131蛋白表达量无显著差异(P>0.05)。结论:1、肉鸡腹水综合征发生发展过程中,肾脏产生促红细胞生成素增多,产生大量红细胞导致血液粘稠,参与了肉鸡腹水综合征发生发展,同时,肾脏促红细胞生成素受体表达降低、肾脏缺氧损伤、自噬增加也参与了肉鸡腹水综合征的发生发展。2、由黄芪、茯苓、当归、大腹皮、丹参、川芎、甘草等组成的自拟复方中药,具有补气补血、行气活血、利水渗湿功效,通过调控肾脏促红细胞生成素及其受体作用,调控血液红细胞生成,改善血液粘稠,改善肾脏缺氧及自噬损伤,有效防治肉鸡腹水综合征发生发展。3、L-精氨酸通过调控肾脏促红细胞生成素,调控血液红细胞生成,改善血液粘稠,改善肾脏缺氧及自噬损伤,有效防治肉鸡腹水综合征发生发展。
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