普萘洛尔对人肺腺癌细胞株A549细胞MMP-9表达影响的实验研究

来源 :泰山医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeyeye5122
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究目的:  通过对普萘洛尔作用于人肺腺癌A549细胞后其基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达变化的研究,并分析这种变化与普萘洛尔浓度的关系,来探讨MMP-9成为肺癌治疗中的一个新靶点的可行性,为肺癌的靶向治疗提供一种新的思路。  研究方法:  (1)体外培养人肺腺癌A549细胞。  (2)挑选生长状态良好且呈对数期生长的细胞,按照随机对照原则分成实验组(给药组)及对照组(空白组),对照组均给予含0ug/ml的普萘洛尔细胞培养液继续培养,实验组分别给予5个不同浓度的普萘洛尔细胞培养液处理,具体的浓度为:实验组1:2ug/ml,实验组2:4ug/ml,实验组3:8ug/ml,实验组4:16ug/ml,实验组5:20ug/ml,每个相同浓度的组内又分为三个小组,分别为培养后12h、24h及48h的小组,并为每个时间段的小组设置六个平行孔。  (3)培养完成后进行测定:将细胞培养液离心,取上清液,应用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(即ELISA法),测量各组细胞对应的人基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平。  实验结果:  (1)显微镜下观察  各组细胞在经过含有不同浓度的普萘洛尔细胞培养液培养后:同一浓度下培养后12h及24h后生长状态及细胞密度无明显变化,但在培养48h后显微镜下观察培养液中有大量漂浮的死亡细胞;不同浓度培养时同一时间段细胞的生长状态及细胞密度无明显区别。  (2)生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定的结果  与对照组相比,5个实验组的细胞经过普萘洛尔细胞培养液培养后,人肺腺癌细胞株A549细胞MMP-9的表达水平下降,且培养后12h>培养后24h>培养后48h。并且经过统计学软件分析结果:P<0.05,说明普萘洛尔浓度与培养时间段这两个因素对所培养细胞MMP-9表达的影响有统计学意义;  实验组4(16ug/ml)与实验组5(20ug/ml)MMP-9的检测浓度降低尤为明显,且降低幅度实验组5>实验组4,而实验组1、2、3降低幅度小,组间比较P<0.05,差异有统计学意义,说明普萘洛尔浓度达到16ug/ml时对所培养细胞MMP-9的表达影响显著,可以作为一个界定浓度,对科研工作有一定的指导意义。  结论:  (1)人肺腺癌细胞株A549细胞普遍表达MMP-9,MMP-9通过对细胞外基质中Ⅳ型胶原的特异性降解,影响肺肿瘤细胞的侵袭和转移能力,使肺癌发生肺内转移及其他部位转移的可能性增加。  (2)普萘洛尔影响体外培养人肺腺癌A549细胞MMP-9的表达,具体影响表现为抑制作用,根据MMP-9在体内的生物学作用,可以得出普萘洛尔有降低肿瘤细胞的侵袭和转移能力,从而减少肺癌的肺内转移及远处转移,为肺癌的靶向治疗提供了一种新思路。
其他文献
目的:探讨顺铂诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡作用的机制及神经生长因子(NGF)、丹参对顺铂耳蜗毒性的防护作用,为临床防治顺铂耳毒性作用提供理论依据.材料与方法:选择耳廓反射灵敏的
【摘 要】看图写话是低年级作文训练的重点内容。让学生写出通顺的句子,能为中、高年级的习作打下基础。低年级的看图写话,通过细致的观察、深入的思考、合理的想象、口头表达、书面写话几个环节的训练,无论画面内容如何,也无论是几幅图的看图写话,孩子们都不会觉得无处下手了。  【关键词】小学 看图 观察 想象 口头表达  小学低年级看图写话是作文最初步的训练,是培养初入学儿童向观察客观事物过渡的一个桥梁和凭借
如何通过课堂教学使学生基本掌握《课程标准》所规定的教学内容,作业大部分在课内完成,只留少量的家庭作业,真正做到既不加重学生负担,又不断提高教学质量呢?本人经过大胆尝试,探索到了几点比较行之有效的教学方法:  一、明确一堂课的教学目标  一堂课的教学目标,定得明确具体,而又恰到好处,就要认真钻研《课程标准》和教材,分析学生的实际情况。  例如,“小数乘法”在学生具备“积随着因数的扩大(或缩小)而扩大