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目的观察重离子与X射线辐射诱导结肠癌SW480细胞发生自噬的情况,以及自噬在放射治疗中所起的作用。方法1.免疫荧光显微镜观察MDC染色后自噬泡的发生。2.流式细胞术定量检测自噬水平、凋亡水平和细胞周期情况。3.透射型电子显微镜(TEM)观察细胞的超微结构。4.蛋白质免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3的表达水平。5.应用Transwell小室观察自噬对SW480细胞侵袭能力的影响。6.应用划痕实验观察自噬对SW480细胞迁移能力的影响。7.通过MTT实验检测自噬与辐射对细胞活性的影响。结果1.重离子与X线辐射能够诱导结肠癌SW480细胞发生自噬,并且自噬水平具有剂量依赖性,即随处理剂量水平的增加而增加(P<0.05)。并且与X线组相比较,重离子组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值更高。2.雷帕霉素能够诱导结肠癌SW480细胞发生自噬,与辐射联合处理时,具有协同作用。3.氯喹能够抑制辐射所诱导的结肠癌SW480细胞发生的自噬。4.辐射处理组、辐射与雷帕霉素联合处理组SW480细胞的侵袭力减弱(P<0.01夕,迁移力减弱(P<0.01)；与辐射处理组相比,辐射与氯喹联合处理组SW480细胞的侵袭力增强(P<0.01),迁移力增强(P＜0.01)。5.辐射处理组、辐射与雷帕霉素联合处理组SW480细胞的活性减弱；与辐射处理组相比,辐射与氯喹联合处理组SW480细胞的活性增强。结论1.辐射可以诱导结肠癌SW480细胞发生自噬,并且随着自噬水平的增加,细胞的侵袭能力减弱,迁移能力减弱,细胞活性下降,提示自噬对细胞起杀伤作用。2.雷帕霉素可以提高SW480细胞的辐射敏感性,而氯喹降低了SW480细胞的辐射敏感性。3.与X线辐射相比,重离子辐射所诱导的自噬更显著。与X线辐射组相比,重离子辐射组的细胞侵袭能力、迁移能力更弱,细胞活性更低,提示重离子对细胞的杀伤作用比X线更强。