【摘 要】
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阿尔兹海默病(Alzheimer’s Disease,简称AD)又称原发性老年痴呆症,是一种不可治愈的、进行性的、致命的慢性神经系统退行性疾病。随着医学的进步以及生活水平的提高,世界上
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阿尔兹海默病(Alzheimer’s Disease,简称AD)又称原发性老年痴呆症,是一种不可治愈的、进行性的、致命的慢性神经系统退行性疾病。随着医学的进步以及生活水平的提高,世界上许多国家的老龄化人口都在急剧增长,人们患有AD的可能性也大大增加。据统计,年龄超过85岁的老人中有接近50%的都是AD患者。在AD的发病早期确诊可以使患者能够有更多的治疗方案,如减少神经元损失的治疗策略等,甚至可以帮助研究人员开发出能够阻止或彻底治愈疾病的治疗手段。但是,尽管AD发病率日益增加,由于AD的早期发病症状例如短期记忆的缺失、行为的改变等往往与正常的人体老年化迹象相关,现阶段仍然缺乏有效的针对发病早期的诊断手段。目前主流的AD致病机理假说是淀粉蛋白假说,该假说认为具有神经毒性的β淀粉样蛋白(Aβ)的聚积是主要致病因素。因此,AD的检测方法主要为在脑组织、脑脊液或血液等特定部位中标记并检测Aβ。迄今为止,Aβ成像探针的开发已经非常广泛,其中Aβ的含量通常通过Aβ结合染料的分光光度测定来评估。常用的Aβ结合染料包括以硫代黄素-T(ThT)为代表的苯并噻唑的衍生物,这些染料对Aβ表现出很高的亲和性。但是它们的缺点也很明显,例如荧光信号弱、与组织自体荧光的重叠大、信噪比低,另外,由于容易发生光漂白现象,ThT及其它衍生物只能在短时间内有明显的荧光成像效果。为了弥补传统成像探针的不足,我们设计利用量子点来作为探针的主要载体。量子点拥有发射波长可选范围广、吸收光谱宽、发射光谱窄且对称、斯托克斯位移大、耐光性强、荧光寿命长等优秀的光学性能,修饰后的量子点的生物相容性也较好,这些特点使其成为传统有机染料的优秀替代品。基于上述背景,本论文设计合成了一种可用于阿尔兹海默病前期诊断的新型量子点探针QD-PEG-BTA,并对其结构、基本性质和对Aβ的检测效果等进行了表征和验证。具体内容如下:(1)以量子点(QD)为核心、以聚乙二醇(PEG)为改良材料、以2-(4-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)苯基氨基)乙醇(BTA)为靶向基团,设计合成一种的新型量子点探针QD-PEG-BTA,并利用核磁共振谱图、质谱证明该探针按照设计的结构合成成功。(2)对量子点探针进行一系列物理化学表征,利用动态光散射图谱测量探针的尺寸,利用紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱表征探针的光学性质,证明探针的大小和主要光学性质由量子点决定。(3)对量子点探针进行一系列生物学检测,利用荧光显微镜技术、TEM、荧光光谱分析等手段,通过该探针与其它材料在脑组织、人造脑脊液等中的对比实验,证实该探针能够用于Aβ(1-40)的检测,且检测灵敏度远高于BTA、ThT,超过四个数量级。
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