14.7T核磁共振波谱无创性评价放射增强的胶质瘤侵袭性

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研究目的:探讨不同剂量的X线对U87及C6胶质瘤细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性和水溶性代谢物的影响,同时在细胞水平评价胶质瘤细胞侵袭性和水溶性代谢物之间的相关关系。研究方法:用0、1、5、10、15Gy的X线分别照射U87及C6胶质瘤细胞,OGy组作为对照组。培养20h后,利用高氯酸提取同一培养瓶中部分胶质瘤细胞水溶性代谢物[胆碱(Cho)、肌酸,Cr)、N-乙酰天门冬氨酸(NAA)],采用体外14.7T高分辨率核磁共振波谱仪获取水溶性代谢物波谱;应用MestRe-c 5.3软件分析采集的核磁共振波谱数据。采用明胶酶谱法测量U87、C6胶质瘤细胞无血清上清中MMP-2活性;剩下的U87、C6胶质瘤细胞采用transwell侵袭实验测量从上室穿到下室的细胞数量。研究结果:得到良好的U87、C6胶质瘤细胞的氢质子波谱。不同剂量的X线放射后胶质瘤细胞的MMP-2活性及胆碱/肌酸(Cho/Cr),胆碱/N-乙酰天门冬氨酸比值(Cho/NAA)比对照组(OGy)均增加且其增长程度与照射剂量有关。从OGy到lOGy胶质瘤细胞MMP-2活性、Cho/Cr及Cho/NAA比值增加,以后随着照射剂量的增加而下降。U87胶质瘤细胞Cho/NAA比值从3.55±0.06(0Gy)增长到9.13±0.30(10Gy),然后下降到5.94±0.15(15Gy);C6胶质瘤细胞Cho/NAA比值从1.07±0.24(OGy)增长到2.77±0.36(10Gy),然后下降到1.73±0.41(15Gy)。U87胶质瘤细胞Cho/Cr比值从2.10±0.29(0Gy)增长到4.92±0.07(10Gy),然后下降到3.69±0.15(15Gy):C6胶质瘤细胞Cho/Cr比值从0.38±0.08(0Gy)增长到0.79±0.03(10Gy),然后下降到0.55±0.08(15Gy)。并且U87和C6胶质瘤细胞Cho/NAA比值与Cho/Cr匕值与上清液中MMP-2活性呈正相关(P<0.01)。U87和C6胶质瘤细胞的Cho/Cr比值、Cho/NAA比值与在transwel1侵袭实验中穿过的细胞数目呈正相关(P<0.01)。U87胶质瘤细胞Cho/Cr比值与穿过基质膜细胞的数目相关系数为0.89(P<0.01)。U87胶质瘤细胞Cho/NAA比值与穿过基质膜细胞的数口相关系数为0.91(P<0.01)。C87胶质瘤细胞Cho/Cr值与穿过基质膜细胞的数目相关系数为0.80(P<0.01)。C87胶质瘤细胞Cho/NAA匕值与穿过基质膜细胞的数目相关系数为0.73(P<0.01)。结论:细胞内代谢物含量的微小变化可以用体外高分辨率磁共振波测得。亚致死剂量的X线可导致U87及C6胶质瘤细胞MMP-2活性增高,Cho/NAA及Cho/Cr比值升高。体外高质量的氢质子波谱有在细胞水平推测胶质瘤侵袭性的潜能。
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