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目的:探讨口腔常用局部麻醉药普鲁卡因（procaine,PCA）对人舌鳞癌CAL27细胞系增殖、迁移、周期、凋亡及自噬的影响,阐明PCA对人舌鳞癌CAL27细胞抑制作用的潜在机制,为局麻药物开发成为治疗口腔鳞状细胞癌药物等新用途提供数据支持。方法:采用不同浓度的PCA（0、0.5、1.0和2.0 mg/mL）处理CAL27细胞,将CAL27细胞分为对照组和0.5、1.0及2.0 mg/mL PCA组,采用CCK-8法和克隆形成法检测各组CAL27细胞增殖率;结晶紫染色法观测各组CAL27细胞形态的改变;划痕法检测各组CAL27细胞愈合面积的百分比;激光共聚焦高内涵筛选平台检测各组CAL27细胞中线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）的改变;流式细胞术检测各组CAL27细胞中活性氧（reactive oxygen species,ROS）的改变、不同周期CAL27细胞百分比和凋亡率;实时荧光定量PCR法检测各组CAL27细胞中周期依赖性激酶抑制因子p21 mRNA表达水平;Western blot法检测各组CAL27细胞中周期依赖性激酶抑制因子p21、抗凋亡蛋白Bcl-2和survivin、促凋亡蛋白Bax、自噬标志性蛋白LC3和p62、细胞外调节蛋白激酶ERK/p-ERK、磷脂酰肌醇三激酶PI3K及丝氨酸/苏氨酸激酶AKT/p-AKT蛋白表达水平;SPSS 20.0统计软件进行统计学分析。结果:PCA能显著抑制CAL27细胞增殖,且具有浓度依赖性,与对照组相较,0.5、1.0和2.0 mg/mL PCA组CAL27细胞增殖率均有明显降低,分别为85.9%、75.0%和42.0%（*P<0.05,**P<0.01）,且各浓度PCA组细胞集落明显减少。PCA能够改变CAL27细胞的形态,与对照组相较,各组CAL27细胞发生不同程度皱缩,1.0和2.0 mg/mL PCA组细胞出现胞间连接丧失、空泡性改变甚至破裂死亡。PCA能够显著抑制细胞迁移,随着浓度的增加,细胞划痕愈合速度变慢,特别是在24 h和48 h（*P<0.05,**P<0.01）。PCA能降低CAL27细胞中MMP水平,促进CAL27细胞中ROS的产生。PCA能诱导CAL27细胞发生G2/M期周期阻滞,与对照组比较,0.5和1.0 mg/mL PCA组G2/M期CAL27细胞百分比明显升高,P21 mRNA和蛋白表达水平显著升高（*P<0.05,**P<0.01）。PCA能促进CAL27细胞发生凋亡,与对照组相比,1.0和2.0 mg/mL PCA所诱导的凋亡率分为12.2%和17.0%;Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax蛋白表达水平则明显升高。PCA能诱导细胞自噬,但同时损害自噬通量,与对照组相较,LC3和p62蛋白表达水平均明显升高。PCA联合自噬抑制剂CQ对细胞增殖的抑制作用强于单独使用PCA或CQ。PCA能够部分抑制ERK通路及PI3K/AKT通路的激活。结论:PCA能够抑制CAL27细胞增殖和迁移;PCA能够上调p21 mRNA和蛋白表达水平,诱导细胞发生G2/M期周期阻滞;PCA能够下调Bcl-2表达水平并上调Bax表达水平,促进细胞凋亡;PCA能够损害自噬通量,抑制自噬后能够进一步促进细胞凋亡;PCA能够部分抑制ERK通路和PI3K/AKT通路的磷酸化。即PCA能显著抑制人口腔舌鳞癌活性,具有显著的治疗效果,该实验结果为口腔舌鳞癌的化学药物治疗提供新的理论依据。