目的:探讨伴DNMT3A突变急性髓系白血病（AML）细胞对巨噬细胞极化表型的影响及其调控机制,探寻潜在治疗靶点。。方法:利用CRISPR-Cas9技术完全敲除急性髓系白血病细胞系SKM-1细胞的DNMT3A基因,构建KO细胞株;利用慢病毒转染技术构建伴随DNMT3A R882H位点突变的SKM-1单克隆细胞株（R882H细胞株）及只转有空载的阴性对照（negative control,NC）细胞株。分别用一代测序、RT-q PCR及Western Blot法检测DNMT3A基因及蛋白的表达水平。细胞增殖-毒性检测（CCK8）方法检测阿糖胞苷药物处理前后细胞增殖的差异,流式细胞术检测不同浓度的阿糖胞苷作用下细胞凋亡差异。借助于转录组测序（RNA-seq）技术比较野生型SKM-1细胞与KO细胞、R882H细胞之间基因表达差异;利用基因集富集分析（GSEA）及KEGG数据库通路富集分析探寻差异信号传导通路。利用STRING数据库分析炎症相关差异基因对应的蛋白之间的相互作用。分别将上述各组AML细胞与单核巨噬细胞系THP-1细胞诱导获得的M0巨噬细胞共培养,检测判断巨噬细胞极化方向,检测评估白血病细胞内炎症因子m RNA水平的改变以及共培养上清中炎症因子的表达水平。建立小鼠皮下成瘤模型,观察皮下瘤的大小,利用免疫荧光技术检测肿瘤组织中浸润的M2型巨噬细胞比例。结果:在SKM-1细胞系上成功构建了DNMT3A KO细胞株、DNMT3A R882H细胞株（包括R882H SC1 and R882H SC2）。RNA-seq发现KO细胞和R882H细胞相对SKM-1野生型细胞（WT细胞）共表达上调基因96个,共表达下调基因185个。其中共下调的基因包括CEBPB（CCAAT增强子结合蛋白β）、KLF2（类Krueppel转录因子2）、JUN（转录因子JUN原癌基因）、FOS（转录因子FOS原癌基因）、IL-1β（白介素-1β）、巨噬细胞炎性蛋白1β（MIP-1β即CCL4,包括CCL4L1、CCL4L2）及巨噬细胞炎性蛋白1α（MIP-1α即CCL3,包括CCL3L1、CCL3L3）。KEGG数据库发现大量差异基因在炎症免疫相关通路富集,如TLR（Toll样受体）信号通路、NF-κB（核因子κB）信号通路。GSEA显示R882H细胞和KO细胞中TLR信号通路较野生型SKM-1细胞呈显著下调趋势（P<0.001）;STRING数据库显示以上差异明显的基因所表达的蛋白存在十分复杂的互作关系,其中Jun、Fos为关键调控蛋白。将以上各组AML细胞株与巨噬细胞分别共培养,发现与对照组（SKM-1细胞组和NC细胞组）相比,共培养体系中实验组（R882H细胞和KO细胞）和OCI-AML3细胞组中共培养的巨噬细胞上M1相关标志物表明显下调（P<0.05）,而M2相关标志物表明显上调（P<0.01）。共培养后实验组AML细胞内炎症因子MIP-1α、MIP-1β和IL-1β的m RNA上升幅度显著低于对照组（P<0.001）,而免疫抑制因子IL-10和TGF-β与对照组无明显差异（P>0.05）。共培养上清中炎症因子MIP-1α、MIP-1β和IL-1β表达量明显低于对照组（P<0.05）。免疫抑制因子IL-10和TGF-β的表达显著高于对照组（P<0.001）。小鼠皮下成瘤实验中,实验组肿瘤的体积及瘤体中浸润的M2型巨噬细胞比例明显大于对照组。结论:伴DNMT3A突变AML细胞可以通过减少炎症因子MIP-1α、MIP-1β和IL-1β的表达,调控白血病相关巨噬细胞的极化进而增强其自身的免疫逃逸能力。