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DNAJC28(DnaJhomolog,subfamilyC,member28)是热激蛋白(Hsp40)家族的一员,是热激蛋白(HSP70)的分子伴侣,因HSP40都含有特殊的J结构域,所以又称为DNAJ。根据分子量大小,可以将热激蛋白分为6个亚家族:Hsp100、Hsp90、Hsp70、Hsp60、Hsp40和小热休克蛋白(如HSP27)。其中Hsp40由于拥有J结构域又被称为DNAJ。本次研究中,我们克隆鉴定了Hsp40家族的一个新成员,DnaJ(Hsp40)homolog,subfamilyC,member28,又名DNAJC28。热激蛋白是动物抗应激反应机制的重要组成部分,对于绵羊抗应激过程起到很关键的作用。DNAJ最初发现于大肠埃希氏杆菌,在真核生物中称为Hsp40,是Hsp70亚类辅助因子,主要调节Hsp70酶的活性。DNAJC28基因是DNAJ家族的一个基因,对于调节相应的Hsp70蛋白生物学功能起到关键的作用。本研究采用RT-PCR、RACE、荧光定量PCR等方法克隆了DNAJC28基因的全长序列,并在mRNA水平和蛋白水平进行了分析,主要研究结果如下:(1)本研究采用RACE等方法,以小尾寒羊为实验材料,克隆了小尾寒羊DNAJC28基因的全长cDNA序列。该基因cDNA全长为2729bp,3’端1228bp,5’端358bp,cds1143bp,开放阅读框编码380个氨基酸。(2)检测到DNAJC28基因在小尾寒羊和杜泊羊中呈现出组织表达差异性。在相同品种不同组织中表达差异显著,检测到在主动脉、肺脏、肾脏表达量较高,而在背最长肌、股二头肌等组织中表达量较低。(3)DNAJC28氨基酸系统进化同源性分析显示,该蛋白在哺乳动物中高度保守,绵羊该基因与牛、山羊相近而与蝙蝠家鼠等相距较远。综上所述,本研究成功克隆了小尾寒羊DNAJC28基因,对该基因序列及其编码的氨基酸序列的结构特征进行了预测,并比较分析了小尾寒羊和杜泊羊DNAJC28基因mRNA水平和蛋白水平上的组织表达谱特征,为后续研究该基因的功能提供了一定的依据