【摘 要】
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目的探讨联合肝脏分隔和门静脉结扎的二步肝切除术（associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy,ALPPS）治疗肝右叶巨块型肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的围术期肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte,TIL）亚群的变化
【基金项目】
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项目名称:广西医科大学第一附属医院“优秀医学英才”科研创新能力培养项目,项目合同编号:180327,项目来源:广西医科大学第一附属医院,项目起止时间:2015.01~2020.12
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目的探讨联合肝脏分隔和门静脉结扎的二步肝切除术（associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy,ALPPS）治疗肝右叶巨块型肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的围术期肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte,TIL）亚群的变化情况,分析TIL亚群在HCC微环境中发挥的作用,从免疫学角度评估ALPPS临床应用的安全性和有效性。方法收集广西医科大学第一附属医院肝胆外科2018年8月至2019年8月期间15例行ALPPS治疗的肝右叶巨块型HCC患者及同期46例行右半肝切除患者的临床资料和病理组织标本。使用倾向评分匹配（propensity score matching,PSM）对ALPPS组和右半肝切除组的患者进行1:1匹配。应用多色标记免疫荧光染色及多光谱成像技术对两组患者癌与癌旁组织中的TIL进行定量分析,检测的TIL包括CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、Foxp3+Treg细胞、CD20+B细胞、CD56+NK细胞,并且分析这6种TIL亚群与ALPPS-Ⅰ期术后肿瘤坏死情况的关系。同时,监测并比较两组患者术前及术后第1、3、5、7天外周血免疫组分的变化趋势,其中免疫组分包括CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、CD19+B细胞、Treg细胞、NK细胞、白介素-6、补体固有成分（C1q、C3、C4）和免疫球蛋白（Ig A、Ig G、Ig M）。结果匹配的右半肝切除组和ALPPS组（包括Ⅰ期和Ⅱ期）之间的TIL阳性表达率比较,除右半肝切除组癌组织中Treg细胞阳性表达率高于癌旁组织（P=0.043）外,其余TIL在ALPPS组Ⅰ期和Ⅱ期之间、右半肝切除组和ALPPS组之间或在同一组癌与癌旁组织之间的比较,差异均无统计学意义。通过持续测量肿瘤体积和肿瘤坏死体积发现,ALPPS-Ⅰ期术后第7天的肿瘤坏死体积占比显著高于术前（P=0.024）。而肿瘤坏死体积占比在ALPPS-Ⅰ期术前与术后第3天、术后第3天和第7天的差异无统计学意义。在ALPPS-Ⅰ期围术期中,高CD8+T细胞浸润组的肿瘤坏死体积占比显著高于低CD8+T细胞浸润组（P=0.048）。术前术后的外周血免疫组分监测中,除了ALPPS-Ⅰ期外周血中的补体固有成分C1q、C3含量明显高于Ⅱ期（C1q:P=0.007,C3:P=0.047）外,右半肝切除组、ALPPS-Ⅰ期与Ⅱ期在术前及术后多个时间点测量的外周血淋巴细胞亚群、免疫效应分子、IL-6等免疫组分变化趋势相当。结论ALPPS围术期中TIL浸润水平维持着动态平衡,相比于右半肝切除术,ALPPS术式本身并未引起TIL浸润程度降低及外周血免疫组分病理性改变而导致严重的免疫抑制。从免疫学角度出发,ALPPS治疗肝右叶巨块型HCC是安全、可行的。另外,ALPPS围术期高CD8+T细胞浸润与肿瘤坏死增加相关。
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