阿尔茨海默病动物模型制备方法的研究

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目的:探讨以AlCl3鞘内注射法建立阿尔茨海默病动物模型的可行性以及与腹腔注射AlCl3、D-半乳糖造模方法的比较,并对应用此两种方法建立阿尔茨海默病(AD)的动物模型进行初步评价。方法:12个月龄SD大鼠,分三个实验。分别予AlCl3鞘内注射5d的方法,确定理想的给药浓度;确定理想的生物材料采集时间;以理想的给药浓度及生物材料采集时间重复实验,建立AD鞘内注射模型。同时以12个月龄SD大鼠腹腔注射AlCl3、D-半乳糖建立AD腹腔注射动物模型。实验均在行为学实验结束后取脑,常规石蜡切片,SABC法进行β-AP、β-APP和tau免疫组织化学染色,观察β-AP、β-APP、tau阳性细胞表达。β-AP免疫组化染色观察SP形成,HE染色观察GVD变化,海马皮层神经元细胞计数。Bielschowsky染色观察NFTs。结果:鞘内注射模型:实验一、二:确定理想的鞘内注射浓度1.5%,生物材料采集时间33天。实验三:重复造模成功。行为学试验模型组比对照组错误次数明显增加,潜伏期明显缩短。模型组皮质、海马β-AP、tau、β-APP免疫阳性神经细胞数量明显增多,表达量增强。模型组顶叶锥体层锥体细胞、海马锥体细胞数显著减少。各组海马神经细胞均发生GVD,模型组GVD细胞数有明显增加;模型组可见神经纤维缠结样病理改变和β-AP沉积。腹腔注射模型:行为学结果模型组比对照组错误次数明显增加,潜伏期明显缩短。可见模型组皮质和海马神经细胞损伤、丢失。GVD细胞数有明显增加,β-AP、tau、β-APP表达的增强、海马及皮层β-AP沉积明显增加,未出现NFT和SP。结论:AlCl3、D-半乳糖腹腔注射模型虽然在行为学及特征蛋白表达方面与AD有相似
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