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Cortactin (CTTN)基因位于人染色体11q13,其蛋白包含五个结构域,从N端到C端依次被称为NTA、REPEAT、Helix、PRD以及SH3。本实验室的前期研究表明CTTN基因在食管癌组织中高频扩增和过表达,并且与淋巴结转移和肿瘤临床分期正相关。细胞水平的功能研究显示CTTN能够促进食管癌细胞系的运动、侵袭以及抗失巢凋亡能力,并且能活化AKT信号通路,但其具体的分子机制尚不明确。本研究以CTTN蛋白的C端结构域为诱饵,利用GST-Pull Down技术捕获CTTN的相互作用蛋白,通过质谱鉴定获得了23个候选分子,其中22个与CTTN之间的相互作用尚未见报道。我们选取了ZYX、IQGAP1、ASPP2、SH3D19以及KIAA1522做了进一步的研究,激光共聚焦观察发现ZYX、IQGAP1和KIAA1522在细胞中与CTTN有明显的共定位,ZYX、IQGAP1和ASPP2能够与CTTN免疫共沉淀。对细胞中即存在共定位又能共沉淀的ZYX、IQGAP1进行了细胞功能实验,发现用RNA干扰技术降低ZYX表达后食管癌细胞的粘附和运动能力下降,抑制IQGAP1表达后食管癌细胞的抗失巢凋亡能力降低。荧光共振能量转移实验发现ZYX和CTTN是直接相互作用,而IQGAP1与CTTN之间可能是间接相互作用。结构域分析结果显示,ZYX与CTTN的相互作用结构域位于其N端富含脯氨酸的200个氨基酸序列中,缺失该区域的ZYX能降低细胞中微丝数量和结构。同时我们还发现CTTN能通过AKT信号通路调节ZYX的蛋白表达水平。以上结果表明,CTTN在食管癌细胞中能与ZYX、IQGAP1以及ASPP2相互作用,其中与ZYX与CTTN之间为直接相互作用,可能参与微丝组装调控,促进细胞的粘附和运动。IQGAP1通过与CTTN间接作用,增强食管癌细胞的抗失巢凋亡。这些资料为CTTN促进食管癌转移的分子机制提供了新的实验证据。