研究背景 少支胶质细胞肿瘤(Oligodendrogliomas，OGs)是源于神经上皮组织的肿瘤之一，占神经系统原发肿瘤的5％～19％。同其它类型胶质瘤一样，OGs发生发展的机制尚未完全阐明；不同的是，OGs具有其自身独特的分子生物学特征，使其成为颅内原发肿瘤中第一个表现出“分子生物学特征”提供重要治疗和预后信息的肿瘤。积极探寻与肿瘤恶性程度和生存预后相关的分子标记物成为了当前OGs的研究热点。为此，我们在评价传统临床预后因素的基础上，探讨了新近发现的原癌基因AEG-1(astrocyte elevated gene-1)和抑癌基因p16INK4a(INK4a，inhibitor of CDK4 a)的表达规律及其与肿瘤恶性程度和预后的关系。 1 研究目的 (1)初步阐明影响少支胶质细胞肿瘤预后的临床因素。 (2)阐述AEG-1和p16INK4a表达规律及其与肿瘤恶性程度之间的关系。 (3)探讨AEG-1和p16INK4a表达与少支胶质细胞肿瘤预后的关系。 2 材料和方法 2.1 研究对象本研究收集中山大学附属第一医院神经外科1996.1～2005.12间收治的少支胶质细胞肿瘤患者42例。按照WHO2000关于神经上皮源性肿瘤分类标准，所有患者的病理结果重新进行判定。42例患者，男22例，女20例，年龄为30.12±13.56岁；依照分类标准分为少支胶质细胞瘤(Oligodendroglioma，OG，WHOⅡ)组和间变性少支胶质细胞瘤(Anaplastic Oligodendroglioma，AOG，WHOⅢ)组。OG组31例，男16例，女15例，年龄28.96±13.41岁；AOG组11例，男6例，女5例，年龄33.09±13.88岁。所有患者术前均无放化疗，均为初次手术。 2.2 实验方法 2.2.1 预后随访以手术日期为随访起点，末次随访时间(2007.11)为终点，通过电话、门诊和书信等方式随访患者的预后。 2.2.2 免疫组化应用EnVision免疫组化法，检测42例少支胶质细胞肿瘤和4例正常脑组织中AEG-1和p16INK4a的表达。AEG-1阳性反应物分布于细胞核周围的胞浆，呈胞浆型。p16INK4a阳性反应物分布于细胞核，呈胞核型。结合阳性细胞所占的百分数和着色程度对免疫组化结果进行判定。 2.2.3 统计分析采用SPSS13.0进行统计处理，其中AEG-1和p16INK4a表达与肿瘤恶性程度的关系用x2检验；用寿命表对各随访年份生存率作生存曲线(a=0.05)，用Kaplan-Meier法进行单因素分析，生存率的比较用Log-rank检验，相关性检验采用Spearmans相关分析。 3 结果 (1)42例患者，获得随访36例，失访6例(14.3％)；最长随访时限141月，最短12月，平均51.73±38.70月。OG组和AOG组的2、3、5年累计生存率分别为91.8％、86.9％,71.6％和68.2％、34.1％，22.7％；中位生存期分别为7.4年和3.1年。单因素分析显示肿瘤恶性程度、肿瘤大小、术后化疗和切除程度(p值均<0.01)是影响预后的临床因素。上述因素经Cox回归分析后，只有肿瘤恶性程度、手术切除程度和术后化疗是影响预后的临床因素。 (2)p16INK4a总阳性率为66.7％(28／42)，OG(WHOⅡ)组和AOG(WHOⅢ)组分别为77.4％(26／31)和36.4％(4／11)(x2=6.16，p<0.05)，表达强度与肿瘤级别呈负相关(r=-0.322，p<0.05)。中位生存期p16INK4a(-)，(+)和(++)组分别为2.3年、4.9年和8.9年(x2=34.72，p<0.01)。Spearmans相关分析显示p16INK4a表达水平与OGs患者的生存时间正相关(r=-0.903，p<0.01)。 (3)AEG-1总阳性率为45.2％(19／42)，OG(WHOⅡ)组和AOG(WHOⅢ)组分别为35.5％(11／31)和72.7％(8／11)(x2=4.55，p<0.05)，表达强度与肿瘤的级别正相关(r=0.392，p<0.05)，4例正常脑组织中均无AEG-1表达。AEG-1(-)，(+)和(++)组的中位生存期分别为7.6年，2.3年和1.6年(x2=32.74，P<0.01)，Spearmans相关分析显示AEG-1表达水平与OGs患者的生存时间负相关(r=-O．876，p<0.01)。 4 结论 (1)肿瘤全切、低肿瘤级别和术后化疗是少支胶质细胞肿瘤患者预后良好的临床因素。 (2)p16INK4a表达水平和强度可作为判断少支胶质细胞肿瘤恶性程度和预后的生物学指标。 (3)AEG-1表达水平和强度对判断少支胶质细胞肿瘤恶性程度和预后具有参考价值。