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核桃(Juglans regiaL.)原产于欧洲东南部及亚洲西部,我国是核桃原产地之一[1,2]。由于核桃是果材兼用的优良经济树种,作为世界四大干果之一,以其很高的经济、生态及社会效益在世界各地广泛栽培,但在核桃优良品种的推广方面存在很多困难。针对核桃微体繁殖中出现的外植体污染率高、接种后褐变严重、继代培养增殖率低、试管苗生根率低且不稳定以及微体嫁接成活率低等问题,进行了核桃组织培养影响因素、核桃体细胞胚胎发生影响因素及其微体嫁接技术的研究。试验结果如下:1.核桃的组织培养研究1.1初代培养的最适培养基为DKW+6-BA1.0mg/L+IBA0.1 mg/L+Vc5.0 mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖30 g/L。1.2 5月中旬到6月上旬取材,污染率均小于5%,最低为3.1%;新梢速长期5月份和8月份取材褐变率均较低, 8月份最低,为25.64%。1.3树龄为8周的实生幼苗,褐变率仅为17.2%,一年生苗的褐变率为26.3%,而成年树的褐变率达48.5%。1.4抗氧化剂与吸附剂试验结果表明,Vc5.0mg/L可以使核桃组培苗的褐变率降到最低,为8.87%。1.5继代培养结果表明,继代培养中6-BA的最有效浓度为1.0 mg/L,相对应的IBA浓度在0.01-0.05 mg/L之间;壮苗培养试验结果表明,以DKW培养基附加0.25 mg/L6-BA和0.03 mg/L IBA的处理对壮苗的作用效果最好;转接周期以25~30d为宜;最适于核桃试管苗的生长和增殖的PH值为5.8。1.6核桃试管苗生根阶段适宜的培养基为1/2DKW+IBA3.0mg/L+AC2.0g/L+琼脂6.0g/L +蔗糖30.0g/L,生根率达到25.93%,而NAA促进生根的效果明显低于IBA。2.核桃微体嫁接研究2.1子苗切根试验结果表明,子苗切胚根后,可促使子苗须根的产生,子苗生长势明显强于未剪胚根的子苗;子苗砧木上胚轴加粗试验结果表明,2000mg/LGA3浸种能显著增加子苗砧木上胚轴粗度,提高砧木质量。2.2微体嫁接试验结果表明,以Ⅱ期子苗作为砧木与Ⅰ级接穗进行嫁接时,嫁接成活率最高,达到40.73%;不同角度“V”型刀具嫁接的成活率试验表明,角度为30°的刀具嫁接成活率最高,达40.03%;不同嫁接方法对嫁接成活率影响的试验结果表明,“V”型刀具嫁接的成活率最高,达40.43%。