论文部分内容阅读
目的:围术期神经认知功能障碍(Perioperative neurocognitive disorders,PND)是老年患者常见的手术并发症,表现为记忆力、注意力及语言理解能力等的损害和社交能力的降低,多见于接受大手术、急诊手术后的老年患者,可使患者住院时间延长,远期并发症发生率和死亡率增加,是影响术后转归的重要原因,同时也给社会造成了严重的医疗和经济负担,其发病机制不清,缺乏有效的预防干预手段。因此,本研究采用同位素标记相对和绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantification,i TRAQ)技术筛选经尿道前列腺电切术(Transurethral resection prostatectomy,TURP)患者中PND与非PND患者的差异表达蛋白,从而为PND的机制研究、防治策略提供新思路。方法:根据纳入及排除标准,收集2019年3月-2019年12月在我院进行经尿道前列腺电切术的老年前列腺增生患者229例,将术后3天的研究对象根据Z计分法,分为围术期神经认知功能障碍(PND)组,非围术期神经认知功能障碍(非PND)组。在PND组和非PND组选取ASA分级、BMI指数、MMSE评分及合并症等术前指标以及手术时间、麻醉时间、术中液体入量、出血量等术中指标无差异的研究对象进行i TRAQ蛋白组学分析。采集外周血3ml,离心提取血清,采用i TRAQ蛋白组学技术筛选PND的差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行生物信息学分析;即:GO分析、KEGG通路分析、结构域(Domain)分析,深入挖掘差异表达蛋白潜在功能以及参与PND的潜在机制。结果:1.该试验纳入了229名择期行前列腺电切手术患者,最终222例患者完成了术后3天MMSE的评估及血液样品采集。将全部患者根据上述PND判定标准分为两组:即PND组和非PND组,其中PND组有32例,非PND组有190例,全麻下经尿道前列腺电切术患者PND的发生率为14.41%。两组患者术前一般情况比较:相比于非PND组,PND组患者的年龄更大、高血压及糖尿病的发病率更高,P<0.05;而两组患者的ASA分级、BMI指数、术前MMSE评分比较,差异无统计学意义,P>0.05;两组患者的手术情况比较结果:手术时间、麻醉时间、术中液体入量、出血量,差异无统计学意义,P>0.05。根据术前情况和术中指标一致性原则在PND组和非PND组中选取3例患者进行i TRAQ蛋白组学检测。两组拟行蛋白组学检测患者的术前ASA分级、BMI指数、MMSE评分及合并症差异均无统计学意义(P 0.05);两组蛋白组学检测患者的手术时间、麻醉时间、术中液体入量、出血量,差异同样无统计学意义(P>0.05)。2.通过i TRAQ蛋白组学技术一共检测到6个样本血清中的1101个蛋白,按照P<0.05以及蛋白相对表达量(ratio)1.2的标准进行筛选,相对于非PND患者,最终筛选出PND患者的8个差异表达蛋白,其中表达上调的蛋白有6个,分别为:Tektin-2、Hephaestin、Methylcytosine dioxygenase TET2、HLA class I histocompatibility antigen、Tubulin beta-2A chain、RUN and FYVE domain-containing protein 1,表达下调的蛋白有2个,分别为:E3ubiquitin-protein ligase RNF213,Rho guanine nucleotide exchange factor 9;进一步对差异表达蛋白进行GO分析、KEGG通路分析、结构域(Domain)分析,发现它们主要参与细胞的生物过程,参与构成细胞成分,同时涉及内吞及吞噬体的生物过程,并且具有E3泛素连接酶的RING结构域。结论:老年患者经尿道前列腺电切术PND的发生率为14.41%;PND患者相对于非PND患者血清中有8个差异表达蛋白,差异蛋白具有E3泛素连接酶的RING结构域、具有参与细胞的生物过程,参与构成细胞成分,涉及内吞及吞噬体的生物过程等生物学功能,这些生物学功能可能是导致PND的内在分子机制。