茶树油对断奶仔猪生长性能及肠道屏障功能的影响

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在养猪生产中,如何提高猪的生长性能和饲料利用率,提高猪的免疫力,降低腹泻率,一直是养猪行业关注的热点;寻求替代抗生素的绿色促生长添加剂成为动物营养与饲料科学的研究热点之一。本研究旨在探索日粮中添加不同剂量茶树油对断奶仔猪生长性能、腹泻情况、肠道组织结构、肠黏膜抗氧化性能、肠黏膜免疫功能及肠道微生物区系的影响,揭示其对断奶仔猪生长、腹泻情况及肠道屏障功能的调控效果与作用机制,探究其替代抗生素的可行性。试验选取21日龄体重相近(6.73±0.12kg)的健康杜X长X大三元杂交断奶仔猪120头,随机分为5组,分别为对照组(CON组,基础饲粮)、抗生素组(ANT组,基础饲粮+200mg/kg硫酸黏菌素(10%)+75mg/kg金霉素(15%))、低茶树油组(LTO组,基础饲粮+50mg/kg茶树油)、中茶树油组(MTO组,基础饲粮+100mg/kg茶树油)和高茶树油组(HTO组,基础饲粮+150mg/kg茶树油),每组6个重复,公母各半,每个重复4头仔猪。试验期21天。整体研究由以下四部分组成:1.茶树油对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及器官指数的影响本试验旨在研究日粮中添加不同剂量茶树油对断奶仔猪生长性能、腹泻情况、血清生化指标和器官指数的影响。试验期间,记录并计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)、腹泻率与腹泻指数;在试验结束时,每重复随机选取1头仔猪采血后屠宰,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺及胰脏,测定器官指数。结果显示:1)MTO组、HTO组ADG较CON组分别增加8.33%和14.84%(P<0.1),F/G分别降低9.58%和7.78%(P>0.05),二者均与ANT组无显著差异(P>0.05);2)与CON组相比,ANT组、MTO组和HTO组腹泻率和腹泻指数均显著降低(P<0.05),其中MTO组降幅最大;3)与ANT组相比,MTO、HTO组谷草转氨酶(AST)及谷氨酰基转移酶(GGT)活性显著降低(P<0.05),LTO组、HTO组葡萄糖(GLU)含量显著降低(P<0.05),各组血清中谷丙转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)和白蛋白/球蛋白(A/G)均无显著差异(P>0.05);4)与ANT组相比,MTO组、HTO组肝脏指数显著升高(P<0.05),LTO组胸腺指数显著升高(P<0.05)。由此可见,在日粮中添加适量茶树油可一定程度促进断奶仔猪生长、降低腹泻,促进肝脏和胸腺的发育,且具有一定的调节代谢作用,可一定程度替代抗生素的使用。2.茶树油对断奶仔猪肠道物理及化学屏障的影响本试验旨在研究日粮中添加不同剂量茶树油对断奶仔猪肠道物理屏障和化学屏障的影响。在试验结束时,屠宰分离仔猪的十二指肠、空肠及回肠,测量长度并称重,分析肠道发育状况;通过制作石蜡切片、HE染色、光学显微镜观察,分析各肠段绒毛高度、隐窝深度及绒隐比值变化;采集小肠中段组织样制作超薄切片,并通过透射电镜观察,分析不同处理对小肠上皮超微结构的影响;采集空肠及回肠黏膜冻存样,检测其抗氧化酶活性,分析肠黏膜抗氧化功能的变化。结果表明:1)与对照组相比,MTO组十二指肠长度、十二指肠相对重量显著增高(P<0.01);MTO组空肠/回肠长度显著高于CON组(P<0.05)且空肠重量有增高的趋势(P<0.1);2)茶树油处理组十二指肠、空肠绒毛高度显著高于CON组和ANT组(P<0.01),茶树油处理组回肠绒毛高度显著高于ANT组(P<0.05);茶树油处理组绒毛高度与隐窝深度比值显著高于CON组和ANT组(P<0.01);3)茶树油试验组肠道绒毛较长,结构较整齐规则,发育比较良好;茶树油处理组小肠上皮微绒毛明显比CON组和ANT组更加纤长、整齐、密集;4)HTO组空肠黏膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于ANT组(P<0.05);茶树油处理组和ANT组空肠黏膜过氧化氢(H2O2)含量显著低于CON组(P<0.05)。HTO组回肠黏膜SOD及谷胱甘肽(GSH)活性显著高于CON组(P<0.05),茶树油处理组和ANT组回肠黏膜丙二醛(MDA)含量显著低于CON组(P<0.05)。由此可知,在日粮中添加适量茶树油可促进肠道发育,使肠道组织结构更完善,并一定程度提高肠黏膜抗氧化功能,从而具有一定的增强肠道物理屏障和化学屏障功能的作用。3.茶树油对断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响本试验旨在研究日粮中添加不同剂量茶树油对断奶仔猪肠黏膜免疫屏障功能的影响。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和空、回黏膜冻存样品中免疫球蛋白和细胞因子含量;RT-PCR检测空、回黏膜免疫相关基因的表达。结果表明:1)MTO组血清中IgA和IgG含量显著增高(P<0.05);MTO组、HTO组血清中IL2、TNF-α和IFN-y含量显著增高(P<0.05);各组血清中IL1β、IL10及IL12含量差异不显著(P>0.05)。2)ANT组和茶树油处理组空、回黏膜sIgA含量有增加的趋势(P<0.1);HTO组空肠黏膜IL2和IL10含量显著高于CON组(P<0.05);HTO组回肠黏膜IL2、IL10、IL12、IFN-γ和TNF-α含量显著增加(P<0.05)。3)与CON组和ANT组相比,MTO组空肠IL1β基因的表达显著提高(P<0.01),MTO组和HTO组空肠IL2基因的表达量显著提高(P<0.05);LTO组和HTO组空肠IL10基因的表达量显著高于CON组(P<0.05);ANT组和MTO组回肠TNF-α基因的表达显著高于其他各组(P<0.01)。4)与CON组相比,MTO组、HTO组及ANT组空肠Occludin基因的表达量显著增高(P<0.01),LTO组回肠Occludin基因的表达量显著增高(P<0.01);MTO组空肠MUC2基因的表达量显著高于其他各组(P<0.01)。由此可知,在日粮中添加适量茶树油可一定程度增加血清免疫球蛋白和细胞因子分泌量,增加肠黏膜细胞因子分泌量,调节肠黏膜免疫屏障相关基因的表达量,具有一定的增强免疫,改善肠黏膜免疫屏障功能的作用。4.茶树油对断奶仔猪肠道微生物屏障的影响本试验通过16SrDNA高通量测序技术反映茶树油对断奶仔猪肠道微生物区系的影响,旨在从肠道微生物屏障角度探究茶树油的作用效果。结果表明:1)茶树油处理组的OTUs高于CON组和ANT组;2)微生物区系α多样性分析表明LTO组和HTO组ACE指数显著上调(P<0.01),茶树油处理组Shannon指数较CON组有增加的趋势(P<0.1);3)β多样性分析表明CON组和ANT组的群落结构较为相似,茶树油各组的群落结构相似,茶树油处理组菌群结构与CON组和ANT组差异较大;4)在门水平,MTO组与HTO组厚壁菌门丰度显著高于CON组和ANT组(P<0.01),MTO组与HTO组拟杆菌门丰度显著低于CON组和ANT组(P<0.01);5)在属水平,与ANT组相比,MTO组和HTO组梭状芽孢杆菌属丰度显著提高(P<0.05),LTO组和HTO组普雷沃氏菌科NK3B31属丰度显著降低(P<0.05);MTO组和HTO组普雷沃氏菌属2丰度显著低于CON组和ANT组(P<0.05)。由此可见,仔猪日粮中添加茶树油可适当增加肠道微生物菌群丰度及多样性,改善肠道菌群结构,可一定程度替代抗生素类饲料添加剂。综合试验结果,适量的茶树油可一定程度促进断奶仔猪生长、降低腹泻,促进肝脏和胸腺的发育,且具有一定的调节代谢作用;可促进肠道发育,使肠道组织结构更完善,并一定程度提高肠黏膜抗氧化损伤功能;可增加免疫球蛋白和细胞因子分泌量,调节肠黏膜免疫屏障相关基因的表达量;可增加肠道微生物菌群丰度及多样性,改善肠道菌群结构;具有一定的增强肠道物理屏障、化学屏障、免疫屏障和生物屏障功能的作用,可一定程度替代抗生素的使用。
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