外周血单核细胞自噬相关蛋白表达的变化及其与冠心病心绞痛关系的研究

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目的:观察ATG5、LC3、P62等细胞自噬相关蛋白在不同类型心绞痛患者外周血单核细胞中表达的变化,探讨单核细胞中自噬体的生成和降解与冠心病临床表现的关系,及其与冠状动脉病变程度的相关性。方法:收集2019年6月至2019年12月间就诊于大连医科大学附属第二医院心内科的住院患者共115例,依据入选标准及排除标准,筛选出对照组患者(Control)34例,稳定型心绞痛组患者(Stable Angina,SA)40例,不稳定型心绞痛组患者(Unstable Angina,UA)41例。入组患者的病史均由心内科医师采集,包括:性别、年龄、体重、身高、吸烟饮酒史、高血压病史(平素血压控制情况,住院期间血压情况)、手术外伤史、慢性肝肾疾病史、风湿免疫疾病史、传染病及家族遗传疾病史等。入组患者均由心内科护士于入院次日采集空腹静脉血,用以检测血常规、心肌标志物、pro-BNP、肾功、肝生化、血脂、血浆D-二聚体、C反应蛋白、同型半胱氨酸等指标,并额外留取2管EDTA抗凝管血液样本,量约4ml。采用Ficoll密度梯度分离法提取单核细胞。通过Western Blot检测不同分组患者单核细胞中ATG5、LC3、P62等自噬相关蛋白的表达情况。入选对照组的患者均行冠状动脉造影或冠状动脉CTA检查,入选稳定型心绞痛组和不稳定型心绞痛组的患者均行冠状动脉造影检查,冠状动脉造影检查均由心内科具有丰富经验的医师完成,冠状动脉CTA检查均由医院影像科完成,根据冠状动脉造影结果进行Gensini评分,评估冠状动脉病变程度;应用SPSS 21软件统计分析相关数据。结果:1.UA组患者中高血压病史占比、吸烟史占比均高于Control组患者,差异具有统计学意义(P<0.05);且UA组患者的平均年龄高于SA组与Control组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.UA组患者的HDL-C低于SA组与Control组患者,差异具有统计学意义(P<0.05);UA组和SA组患者的TC、LDL-C、Gensini评分高于Control组患者,且UA组患者Gensini评分高于SA组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.Control组、SA组与UA组患者的性别、收缩压、舒张压、BMI、WBC、NEUT#、MONO%、PLT、Hb、ALT、AST、LDH、Ure、Cr、UA、Apo A1、Apo B、c Tn I、CK-MB、pro-BNP、Hcy、D-dimer等差异无统计学意义(P>0.05)。4.UA组与SA组患者外周血单核细胞中ATG5与LC3表达水平高于Control组患者,但UA组患者表达低于SA组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.SA组患者外周血单核细胞中P62表达水平较Control组患者无明显统计学差异(P>0.05);但在UA组患者外周血单核细胞中P62表达水平高于SA组与Control组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。6.相关性分析发现,在心绞痛组患者外周血单核细胞中自噬相关蛋白的表达水平与冠状动脉病变程度(Gensini评分)具有相关性:ATG5表达水平与Gensini评分呈负相关,rs=-0.694,P<0.001;LC3表达水平与Gensini评分呈负相关,rs=-0.672,P<0.001;P62表达水平与Gensini评分呈正相关,rs=0.715,P<0.001。结论:1.心绞痛患者外周血单核细胞中自噬体生成增加,但随心绞痛进展自噬体生成逐渐减少,说明自噬体的生成可能与冠心病心绞痛的发生发展及变化相关;2.不稳定型心绞痛患者外周血单核细胞中自噬体清除减少,说明自噬体清除可能与冠心病心绞痛的发展与变化相关;3.冠心病心绞痛患者外周血单核细胞中自噬体的生成及清除可能与冠状动脉病变程度相关。
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