【摘 要】
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人α肿瘤坏死因子（Human Tumor Necrosis Facfor hTNF）是由激活的巨噬细胞产生的一种多功能细胞因子，其最显著的活性特征是可以在体内或体外特异地杀伤多种肿瘤细胞，而对正常组织细胞则无明显的杀伤作用。此外，TNF还具有抗病毒感染、抑制病毒复制、激活巨噬细胞和多形核粒细胞，增强其细胞毒作用和吞噬功能，促进组织相容性抗原的表达、促分化诱导以及调节机体的免疫应答等多种重要的生物功
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人α肿瘤坏死因子（Human Tumor Necrosis Facfor hTNF）是由激活的巨噬细胞产生的一种多功能细胞因子，其最显著的活性特征是可以在体内或体外特异地杀伤多种肿瘤细胞，而对正常组织细胞则无明显的杀伤作用。此外，TNF还具有抗病毒感染、抑制病毒复制、激活巨噬细胞和多形核粒细胞，增强其细胞毒作用和吞噬功能，促进组织相容性抗原的表达、促分化诱导以及调节机体的免疫应答等多种重要的生物功能，是一种具有潜在前途的抗肿瘤、抗病毒感染以及免疫调节生物制剂。目前，美国、西德、日本等国家已开始用重组人肿瘤坏死因子(rhTNF进行临床Ⅰ、Ⅱ期试验，并显示出良好的应用前景。 国内肿瘤坏死因子的研究起步较晚，由于TNF来源受到限制，难以对TNF的各种生物功能进行广泛的研究，更不能进行临床试用和疗效观察。为此，我们在自己设计构建的一组具有不同核糖体结合位点（Ribosoee Binding Sne，RBS）表达载体的基础上，将去信号肽的hTNF cDNA克隆到上述载体，并使其在大肠杆菌中获得了极高效的表达。经诱导后肿瘤坏死因子的表达量可达细菌总蛋白50％以上，活性可达1.02×109单位／升菌液。在此基础上，又建立了经济，易行的利用常压离子交换色谱技术从大肠杆菌中分离提取表达产物的流程，并成功地纯化了rhTNF，纯化产物纯度为电泳纯，比活性达1.12×107单位／毫克蛋白。上述研究为国内开展肿瘤坏死因子的理论研究和临床应用提供了丰富的材料来源。 大肠杆菌表达系统的一个主要缺陷是外源基因的表达产物不能有效的分泌。外源蛋白在大肠杆菌细胞质中大量合成而不分泌会带来以下问题：（1）引起蛋白多肽的沉淀和凝集，
其他文献
由外伤、肿瘤、炎症和先天性发育障碍等原因造成的骨缺损很难进行自身修复，因此，寻找理想的骨修复材料一直是国内外学者致力研究的重要课题。早在十九世纪末期，Senn等就报导了脱矿骨可作为防腐剂的释放系统用于修复骨腔缺损。本世纪60年代初期，Urist等发现控制脱矿温度、时间及盐酸浓度可制备出具有稳定诱骨活性的脱矿骨。Urist等认为，脱矿骨之所以有诱骨活性主要是因为在其中含有一种诱导骨形成的蛋白质，此蛋
小肠粘膜上皮细胞的增殖，分化及脱落的调节机制一直受到人们的关注。一般认为有内源性的生长刺激因子及生长抑制因子来调节这些过程。本文主要探讨生长抑制因子。国外已报道了几种动物小肠粘膜中存在抑制肠细胞增殖的生物学活性的物质，但狗肠粘膜中是否存在生长抑制因子，这种物质对肿瘤，特别是肠道肿瘤细胞代谢的影响如何，尚未见报道。本研究从正常小肠粘膜中分离出肠腺生长抑制因子（CGI），利用新鲜培养的肠细胞的3H-T
FOS蛋白是原癌基因c-fos的翻译后表达产物，外周刺激引起的神经元活动，可通过FOS蛋白表达神经元显示而检查出来，从而可探知中枢神经系统内的功能通路，将之与标记法结合，又可同时显示神经元的联系关系。 为了探索FOS蛋白表达与刺激传导的关系，本文用几种技术方法的结合，研究了三叉神经领域痛觉传递道路上的FOS蛋白表达的特点，得到下列几点有意义的结果： 1.将10％福尔马林150μl注射到
人白细胞介素-3（human Interleukin 3，hiL-3）是一种造血前体细胞早期分化的关键调节因子。用PCR方法从人T淋巴细胞cDNA文库中扩增出0.44bp的DNA片段，序列分析后确定含有完整的hiL-3成熟蛋白编码顺序，并在信号肽与成熟蛋白编码顺序之间突变入了限制性内切酶位点和ATG起始码。构建的PL启动子控制下的hiL-3cDNA表达质粒，转入大肠杆菌后经培养、诱导获得hiL-3
鼠源性单克隆抗体由于具有免疫原性不能在人体反复应用，而人源性单抗的制备还存在许多困难，如不太稳定，抗体产生水平低等，再者目前所制奋的人源性单抗多为IgM类，不太适合应用。利用基因工程技术可根据人们的需要制备各种类型的新型抗体。 抗体可变区基因的分离是研制基因工程抗体的关键步骤之一，体外扩增（PCR）是获得抗体可变区基因的一种最简便、最迅速的方法。在进行PCR之前，必须首先设计和合成引物，在被
转化生化因子α（TGFα）是一种小肽分子，正常细胞较少产生，而在许多肿瘤组织（肾癌，黑色素瘤等）却大量合成。TGFα与细胞表面的表皮生长因子受体（EGFR）结合，以自分泌方式参与肿瘤的形成和生长，具有重要的肿瘤诊断、预后及疗效评估意义。胶质瘤是临床常见的肿瘤之一，其死亡率极高。有关胶质瘤中TGFα状况的文献报道较少且互有出入。采用分子生物学方法研究胶质瘤中TGFα及相关基因的改变并予以纠正具有重要
进行性肌营养不良（Duchenne muscular dys-trophy DMD），是男性最常见的X连锁隐性致死性遗传病，发病率约为活产男婴的1/3，500，该病以进行性肌肉萎缩坏死为特征，直至机体衰竭死亡。目前尚无有效的延缓或阻止病程发展的治疗方法，因此，研究可靠的诊断与检测携带者方法具有重要的意义。 反向遗传学为DMD及其临床表现较温和的等位基因形式BMD的研究奠定了基础，从DMD/B
艾滋病（AIDS）是本世纪80年代初发现的一种烈性传染病，被称为“超级癌症”，5年病死率为100％，致病因子为人免疫缺陷病毒（HIV）。HIV在体内繁殖时，其mRNA先翻译出3种多聚蛋白质（均为结构蛋白质）：Pr55gag，Pr160gag-pol和gP160，其中前两种多聚蛋白质在HIV基因编码的蛋白酶（Pr）的切割下，生成HIV成熟所必须的4种核心蛋白和4种酶。如果Pr的活力不足，就会造成HI
反思当下幼儿游戏的水平和意义,教师应当如何站在儿童的视角,支持幼儿高水平的游戏,以引发幼儿深度学习,我们认为首先需要把握"高水平游戏"和"深度学习"的关系,明确研究目标;其次确立以探究"支持幼儿高水平游戏策略"为主要目标,来推动深度研究;最后以"引发幼儿深度学习"为导向,梳理和运用策略。在幼儿游戏中,我们常深入地观察、反复地研读。面对当下幼儿的游戏,我们思考:幼儿进行的都是好游戏吗?
转基因动物是近些年才发展起来的生物高技术，经过科学家们近十年的辛勤努力，无论是在该技术的研究本身，还是在该技术的应用领域都已取得了令人瞩目的成就。迄今，利用该技术所取得的研究成果已充分展示了转基因动物技术在分子生物学、分子遗传学、分子免疫学、肿瘤工程学、医学及畜牧学等研究领域无限广阔的应用前景。因而，正吸引越来越多的优秀科学家投身于该领域研究的行列。 1982年，美国华盛顿大学医学院生物化学