目的:探究橄榄苦苷对HK-2细胞缺糖缺氧损伤的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:从美国ATCC细胞库购买人肾小管上皮细胞(HK-2),到货后迅速于光学显微镜下观察形态、密度、有无污染。确定无异常后,放置在培养箱中4-6h。细胞缺氧复氧模型的制备:按照95%N2,5%CO2的通气比例调节三气培养箱,模拟体外缺氧环境来处理HK-2细胞。在缺氧24小时后,复氧不同的时间,用光学显微镜观察细胞表型以明确模型的制备条件。按照不同的处理方式将细胞分组:正常对照组(Control组)、单纯缺氧24h复氧3h组(IR组)和缺氧24h复氧3h后加不同浓度的橄榄苦苷(分别为10、50、100、200μmol/L)干预组。用CCK-8检测各组细胞的A450值,与正常组比较算出细胞的存活率,Hoechst染色检测各组细胞的凋亡情况,Western Blot法测定B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的蛋白表达量。结果:1.细胞缺氧24h,复氧不同时间后,细胞表型呈现出一定的时间依赖性。但缺氧24h复氧3h即足够模拟体外的肾缺血再灌注损伤;2.CCK-8检测结果显示,橄榄苦苷能够提高HK-2细胞在缺糖缺氧环境下的细胞存活率;3.Hoechst33258染色后显微镜下可见细胞核出现核固缩、染色质凝聚和凋亡小体形成等凋亡相关改变,并呈现出一定的浓度依赖性,这说明橄榄苦苷可减少缺糖缺氧损伤引起的细胞凋亡,降低细胞凋亡率;4.Western blot结果显示,橄榄苦苷能够增加细胞Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:橄榄苦苷对HK-2细胞的缺糖缺氧损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制细胞凋亡有关。