【摘 要】
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海洋赤潮的预防与治理是世界性难题。相比于物理及化学的治理方法,生物防治法更加绿色环保,成本也更低。生物防治法被认为是潜在的赤潮防治方法之一。其中微生物来源的间接溶藻现象,即释放溶藻活性物质的研究近年来成为了热点。细菌来源的溶藻活性物质的报道较多,真菌来源溶藻活性物质报道较少。本文利用溶藻活性筛选了6株深圳海域海洋来源的真菌（DS4-2、DS3-4、A1-3、HK-42、HK-43、HK-49）不同
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海洋赤潮的预防与治理是世界性难题。相比于物理及化学的治理方法,生物防治法更加绿色环保,成本也更低。生物防治法被认为是潜在的赤潮防治方法之一。其中微生物来源的间接溶藻现象,即释放溶藻活性物质的研究近年来成为了热点。细菌来源的溶藻活性物质的报道较多,真菌来源溶藻活性物质报道较少。本文利用溶藻活性筛选了6株深圳海域海洋来源的真菌（DS4-2、DS3-4、A1-3、HK-42、HK-43、HK-49）不同发酵条件下的产物,发现具有溶藻活性的菌株3株（DS4-2、HK-49、A1-3）,其中A1-3为溶藻活性最强的一株海洋真菌,经菌株形态特征和ITS r DNA测序鉴定其为烟曲霉属真菌（Aspergillus fumigatus）。通过预实验确定溶藻活性物质的极性部位后,将Aspergillus fumigatus A1-3扩大发酵,采用柱色谱法（硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析）与高效液相色谱法分离获取单体化合物。进而采用波谱法（核磁共振谱、质谱）结合文献数据来确定单体化合物的结构。从Aspergillus fumigatus A1-3的大米发酵物中共分得16个单体化合物,全部鉴定了结构,它们分别是:12β-methoxy-13α-methoxy-verruculogen（C1）、verruculogen（C2）、fumitremorgin B（C3）、fumiquinazoline C（C4）、fumiquinazoline E（C5）、fumiquinazoline D（C6）、3-hydroxyfumiquinazoline A（C7）、fumigatosides F（C8）、chatominine（C9）、azaspirofurans A（C10）、queston（C11）、trypacidin（C12）、1.2-seco-trypacidin（C13）、asperfumin（C14）、dimethyl 2,3’-dimethoxyosate（C15）、ethyl asterrate（C16）。通过单体化合物对海洋卡盾藻的溶藻测试,发现化合物C1、C2、C3和C12在终浓度为100μg/m L,胁迫藻细胞两小时后,都对藻表现出很强的抑制作用,其中化合物C12在15 min便可将藻细胞全部溶解,对藻的抑杀能力是分离的化合物中最强的。而化合物C1、C2、C3、C14、C15和C16则表现出时间依赖效应,随着时间的增加,藻细胞形态发生不可逆形变,正常的生理活动受到影响,最终导致藻细胞死亡,进而导致藻细胞的死亡率升高。
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