桃小食心虫Carposina sasakii Matsumura是一种分布非常广泛的果树害虫,主要危害蔷薇科和鼠李科的果树,该虫大规模的发生严重限制了我国果树业绿色健康发展。为了规避化学药剂对环境带来的诸多不利因素,开发新型的昆虫植物源引诱剂是目前最为有效的手段。本文借助桃小食心虫的性诱剂调查了延安市辖区内宝塔区河庄坪镇、富县羊泉镇、甘泉县下寺湾镇和安塞县沿河湾镇4个地区的桃小食心虫的种群消长规律;采用第二代测序技术以及生物信息学的方法鉴定了大量的桃小食心虫触角中嗅觉相关基因;利用原核表达系统表达纯化了重组的气味结合蛋白CsasGOBP2、CsasOBP14、CsasOBP15及化学感受蛋白CsasCSP5并利用荧光竞争结合试验筛选了具有强烈结合的寄主植物挥发物;利用实时荧光定量PCR检测了CsasGOBP2、CsasOBP14和CsasOBP15在桃小食心虫不同组织的表达特点,推测其生理功能。主要实验结果如下:(1)通过2018年4月至10月诱捕实验发现,桃小食心虫一年发生2代,是否存在完全的第三代尚不能确定。成虫于5月下旬开始出土的越冬代羽化时间极不一致。全年有两个诱集高峰期,分别在6月底至7月初和8月上中旬,诱虫量分别可达38.18头/套和31.04头/套;全年总共诱捕了桃小食心虫数量为8261头,每套诱捕器平均可诱虫172.4头/套;虫果率控制在14.5%~22.9%之间,防治效果介于66.2%~83.8%之间。(2)实时荧光定量结果表明CsasGOBP2、CsasOBP14和CsasOBP15基因在桃小食心虫的各个组织中均有表达,除了CsasGOBP2在腹中的表达量高于触角外,CsasOBP14和CsasOBP15在触角中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),推测在这3种基因在桃小食心虫嗅觉通讯中发挥重要作用。CsasGOBP2在腹中表达量高于触角,推测其可能参与昆虫的嗅觉识别和OBPs的转运。CsasGOBP2在雌虫触角表达量显著高于雄虫(P<0.05),约是雄虫触角表达量的78.9倍;CsasGOBP2在雌虫腹中大量表达,高于雌雄虫触角的表达量。此外CsasGOBP2在胸和翅中也有较高水平的表达,而在头和足微量表达。CsasOBP14和CsasOBP15在雄虫触角中的表达量显著高于雌虫,约为16倍。(3)在桃小食心虫的触角中鉴定到嗅觉相关的基因共118种,其中包括26种OBPs、16种CSPs、46种ORs、28种IRs基因和2种SNMPs。成功构建了CsasGOBP2、OBP14、OBP15和CSP5蛋白的原核表达系统,纯化出了富有活性的重组蛋白,rCsasCSP5在上清中表达。荧光结合竞争实验揭示了rCsasGOBP2与正十二醇(K_i=3.82μM)和橙花叔醇(K_i=3.30μM)具有强烈的结合活性(K_i<20μM);rCsasOBP14与梨酯的结合能力最强,K_i=2.65μM,其他物质结合能力较弱rCsasOBP15结合谱非常广,与桃小食心虫主要性信息素有强烈的亲和力(K_i=5.07μM);与植物挥发物1-癸醇(K_i=9.11μM)、十二醇(K_i=5.46μM)、橙花叔醇(K_i=1.53μM)、十二醛(K_i=8.04μM)和梨酯(K_i=4.86μM)具有强烈的亲和力(K_i<20μM);本实验筛选了6种气味物质:梨酯、正十二醇、1-癸醇、橙花叔醇、癸醛和十二醛。