研究背景：全世界范围内肿瘤引起的死亡中，原发性肝癌是其中的第三大原因，在中国肝癌已成为第二大肿瘤致死原因，由于原发性肝癌血供丰富，肿瘤易于通过血液转移和扩散至毗邻和远隔器官，如何预测或发现原发性肝癌治疗后的早期复发和转移，是当前肝癌防治领域的研究热点。非可控性炎症与恶性肿瘤的发生发展关系密切，炎症微环境是肿瘤细胞和机体自身抗肿瘤免疫的主要战场，正常状态下机体免疫系统可通过免疫监视功能识别和清除发生恶性转化的细胞，然而免疫监视作用有一定的限度，且肿瘤细胞可以通过分泌抑制性细胞因子，诱导抑制性免疫细胞的产生等机制来抑制机体的免疫应答反应，进而促进肿瘤的发生发展。大部分原发性肝癌患者具有长期的慢性病毒性肝炎以及肝硬化病史，由于肝脏慢性炎症的长期存在，大量杀伤性T细胞被耗竭，肝脏逐渐进入免疫抑制状态。原发性肝癌患者外周血循环中的免疫细胞诸如骨髓来源抑制细胞（myeloid-derived suppressor cell，MDSC），表达Tie2的单核细胞（Tie2-expressing monocytes，TEMs）和血清中表达的大量炎症细胞因子都可以反映肝癌患者的免疫状态，有作为诊断原发性肝癌和检测治疗后复发的无创性标志物的潜在应用价值，可为微波消融联合过继性免疫方法治疗原发性肝癌提供临床指导。方法：第一部分，前瞻性入组2012年9月至2013年12月拟接受微波消融或经动脉化疗栓塞（TACE）治疗的原发性肝癌患者85例，治疗前根据肿瘤进展情况分为早期肝癌组和进展期肝癌组，并设置20名健康对照组，利用流式细胞学方法检测外周血中MDSC、TEMs的比例，比较各组之间上述免疫细胞的比例有无差异；利用流式细胞微球芯片捕获技术检测血清中Th1、Th2、Th9、Th17、Th22相关细胞因子的浓度，并比较各组之间上述细胞因子表达水平有无差异。第二部分，前瞻性入组2012年9月至2013年12月接受微波消融的早期原发性肝癌患者45例，微波消融前采用流式细胞学方法检测外周血MDSC、TEMs的比例；采用流式细胞微球芯片捕获技术检测血清中相关细胞因子的浓度。患者随后接受微波消融治疗，记录患者临床病理资料，随访获得微波消融后肝内复发情况。利用统计学方法分析45例原发性肝癌患者临床病理资料、外周血MDSC比例、TEMs比例以及相关细胞因子水平与微波消融后肝内复发之间的关系。结果：在本研究第一部分中，我们发现与健康对照组成人相比，原发性肝癌组患者外周血中MDSC的比例显著增高，且进展期肝癌组患者MDSC的比例明显高于早期肝癌组患者；与健康对照组成人相比，原发性肝癌患者外周血中TEMs的比例显著增高，进展期肝癌组患者的TEMs比例高于早期肝癌组，但两组之间差异无统计学意义，进展期肝癌组患者中伴有门静脉癌栓组患者的外周血TEMs比例明显高于不伴门静脉癌栓组患者；与健康对照组成人相比，原发性肝癌患者血清中Th1相关细胞因子IL-12、IL-2、IFN-γ的浓度明显升高，但进展期肝癌组患者Th1相关细胞因子IL-12、IL-2、IFN-γ的浓度与早期肝癌组无统计学差异；与健康对照组成人相比，原发性肝癌患者血清中Th2相关细胞因子IL-4的水平显著升高，且进展期肝癌组患者的IL-4水平明显高于早期肝癌组；与健康对照组成人相比，原发性肝癌患者血清中Th17相关细胞因子IL-17A的浓度明显升高，且进展期肝癌组患者的IL-17A表达水平明显高于早期肝癌组；与健康对照组成人相比，原发性肝癌患者血清中Th22相关细胞因子IL-22的浓度明显升高，且进展期肝癌组病人的IL-22表达明显高于早期肝癌组。我们初步选定外周血MDSC比例、TEMs比例、血清IL-17A、IL-22浓度作为第二部分研究的主要指标。在本研究第二部分中，我们根据45例早期肝癌患者治疗前外周血中MDSC、TEMs的比例、血清中IL-17A、IL-22的水平和随访获得的肝内复发情况绘制受试者工作特征曲线（ROC），确定了上述检测指标预测复发的临界值，分别为外周血MDSC比例（12.45%）、外周血TEMs比例（15.15%），血清IL-17A浓度（12.77pg/ml）、血清IL-22浓度（85.54pg/ml），对45例原发性肝癌患者的临床病理特征和上述四项免疫指标与微波消融治疗后肝内复发情况进行了单因素分析，其中AFP≥20ng/ml（P=0.023）、肿瘤Edmondson-Steiner分级III-IV级（P=0.002）、外周血TEMs比例≥15.15%（P＜0.0001）、IL-22≥85.54pg/ml（P＜0.0001）与微波消融后复发相关。将上述指标应用Cox比例风险模型进行多因素分析，结果发现原发性肝癌患者外周血TEMs比例≥15.15%（P=0.003）、血清IL-22≥85.54pg/m（P=0.011）是影响微波消融术后肝内复发的独立危险因素。结论：通过对20例健康对照组成人和85例不同进展阶段的原发性肝癌患者外周血MDSC、TEMs比例以及血清中相关细胞因子水平的检测，初步筛选出可能与肝癌发生、发展有关的四种免疫指标，即外周血MDSC比例、TEMs比例、血清IL-17A、IL-22浓度；对45例接受微波消融治疗的原发性肝癌患者治疗前进行上述四项免疫指标检测，并随访其微波消融治疗后肝内复发情况，证实外周血TEMs比例、血清IL-22浓度是影响原发性肝癌患者微波消融后肝内复发的独立危险因素，具有预测患者治疗后复发的潜在应用价值。